河豚NKEF与PBEF基因鉴定、功能及机制研究.pdfVIP

摘 要 论文围绕NKEF与PBEF这两类细胞因子分别开展了其基因鉴定、功能及机 制的研究． 第一篇为利用基因共线性等生物信息学方法，首次将两个高度保守基因 NKEF．A与NKEF．B在鱼类中成功预测、克隆及进行生物信息学分析，并在 rnRNA水平比较了两者在正常机体及LPS刺激情况下表达谱的变化，初步探讨 了两者在免疫调控功能上的异同。NKEF序列在物种间的高度同源性以及活性位 点的高度保守性暗示了其抗氧化功能的普遍性。我们利用原核表达产生的可溶性 蛋白用以研究NKEF的抗氧化功能，并初步探讨了其作用机制。实验从体外分 子水平、细胞水平、细菌模型和斑马鱼模型等层面均证明NKEF具有抗氧化功 首次发现的NKEF具有过氧化氢酶样功能有关．实验发现氧化型与还原型NKEF 均具有该过氧化氢酶样活性，且其功能与空间结构有关。 第二篇为利用生物信息学方法首次克隆了河豚的PBEF基因并对之进行了生 物信息学分析，且在mRNA和蛋白水平检测了PBEF在正常机体中的表达情况。 由于不同物种PBEF具有较高的同源性，尤其是和烟酰胺的结合位点在物种问非 常保守，这暗示其NAmPRTase活性在进化上高度保守。我们将河豚PBEF基因 导入细菌并诱导其可溶性蛋白的表达，细菌模型证明导入脊