[医药]地中海贫血基因检测的临床应用.pptVIP

地中海贫血基因检测在临床诊断上的应用 地中海贫血 地中海贫血，又称海洋性贫血，是一种常见的单基因遗传性溶血性血液疾病。 广泛分布在全世界沿海地区。 中国常见于东南沿海、西南 地区以及台湾地区。 地中海贫血的分布 地中海贫血 地中海贫血的共同特点是由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成，致使血红蛋白的组成成分改变。 地中海贫血分为α-地中海贫血和β-地中海贫血。 α-地中海贫血 非缺失型α-地贫 概念： α基因发生点突变或少数几个碱基的缺失。 中国常见的非缺失型突变： Hb CS ?2 CD 142 TAA?CAA (Gln) Terminator mutation Hb QS ?2 CD 125 CTG?CCG (Leu?Pro) Unstable Hb Hb WS ?2 CD 122 CAC?CAG (His?Gln) Unstable Hb 特点： 常发生于α2基因，比缺失型导致更严重的α珠蛋白链合成的减少。 ?-地中海贫血 ?-地中海贫血是一种由于?-珠蛋白基因突变导致肽链合成减少或缺乏而产生的单基因遗传血液病，多由?-珠蛋白基因点突变所致。 在中国人群中常见的突变位点有CD41-42M， -28M， IVS-II-654M，CD71-72M等 ?-地中海贫血突变类型 编码区的移码突变、无义突变和起始密码突变： 如CD41-42，CD71-72 ，CD17突变后形成终止子，表现为?0。 非编码区IVS-1和IVS-2突变 如IVS-II-654突变影响mRNA的拼接，表现为?＋。 影响转录的突变： 如-28，-29的突变影响基因的转录，表现为?＋ 。 人类不同时期血红蛋白的组成 胚胎期血红蛋白： Hb Gower 1 （x2 e2 ） Hb Gower 2 (a2 e2) Hb Portland (x2 g2) 即Hb Portland 1 另有少量Hb Portland 2 (x2 b2)，Hb Portland 3 (x2 d2) 胎儿期主要血红蛋白： HbF （a2 g2 ） 成人主要血红蛋白： HbA （ a2 b2）约占血红蛋白总量96.5—97.5% HbA2 （a2 d2 ） 约占血红蛋白总量2.5—3.5% HbF （ a2 g2）约占血红蛋白总量1%以下。 a地贫的基因型与表现型 a地贫的基因型与表现型 a地贫的基因型与表现型 a地贫疾病严重程度的单倍型顺序 a2a1T a2- - a1a2Ta1 -a1T - - ?地贫的基因型与表现型 ?地贫的基因型与表现型 中国南方高发区的主要突变类型 ?-地中海贫血基因检测 ?-地中海贫血基因检测的临床意义 对?-地中海贫血进行基因确诊，结果准确可靠。 同时检测 --SEA、-?3.7、-?4.23种缺失型 可检出无临床症状的静止型?-地贫（??/ -?3.7、 ?? /-?4.2） 应用：婚前检查、产前检查及产前诊断。 ? -地中海贫血基因诊断操作流程 ?-地中海贫血基因诊断 ?-地中海贫血点突变基因检测 同时检测 ? CS、 ? QS、 ? WS点突变 β-地中海贫血基因诊断 可对17个突变位点 (8个常见位点及9个少见位点)进行检测 合理的探针设计明显减少了非特异性杂交反应的发生 位点设计更合理，绝大部分突变位点都有相应正常对照，结果易于判定 β-地中海贫血基因诊断操作流程 β-地中海贫血基因诊断结果判读 M DNA Marker 1. (?? /?? ) 1.8kb 2. (?? / -? 4.2) 1.8kb; 1.6kb 3. (?? / -? 3.7) 2.0kb; 1.8kb 4. (-? 4.2 / --SEA ) 1.6kb; 1.3kb 5. (-? 3.7 / --SEA ) 2.0kb; 1.3kb 6. (??/--SEA ) 1.8kb; 1.3kb M 1 2 3 4 5 6 M ? -珠蛋白基因型 PCR产物片段长度 -? 3.7 2.0kb ?? 1.8kb -? 4.2 1.6kb --SEA 1.3kb 临床报告单－－样式 Wild type CSM WSM QSM 临床意义： 作为 ? -地中海贫血三种缺失型的补充，对怀疑? -地中海贫血有漏诊的患者进行? CS、 ? QS、 ? WS点突变的诊断，确定具体的基因突变类型 41-42N 654N －28N 71