非小细胞肺癌基因检测PPT.ppt

非小细胞肺癌基因检测 肿瘤二科 刘丽珠 ;前言;EGFR突变检测中需要明确的几个基本概念;EGFR基因突变检测概念;Nature Review 2007, 7:169;标本采集及病理评估;EGFR突变检测中的相关角色;用于EGFR突变检测的标本;标本问题;标本因素对EGFR突变检测的影响 --肿瘤组织特点--;标本因素对EGFR突变检测的影响 --组织标本种类--;图4. EGFR基因检测使用的临床样本及其操作。A.被切成10微米的石蜡包埋标本。B.在支气管镜下将刷检样本放在生理盐水中洗净（悬浮），可以就这样冷冻保存，C.进一步将该生理盐水液离心，沉淀溶解于AL缓冲液，此状态可以室温保存。 ;肿瘤组织标本的采集及病理评估;检测方法;直接测序法流程及数据分析;;测序法与ARMS法比较;小结：;EGFR激酶抑制剂的耐药性;EGFR激酶抑制剂耐药的处理原则;EGFR激酶抑制剂耐药研究进展; ALK 融合基因是新发现的 NSCLC 驱动基因，其中棘皮动物微管相关类蛋白 4（EML4）基因与 ALK（间变性淋巴瘤激酶）的融合（EML4-ALK）为最常见类型。ALK 融合基因主要出现在不吸烟或少吸烟的肺腺癌患者，且通常与 EGFR 基因突变不同时存在于同一患者。 NSCLC 患者中 ALK 融合基因的发生率约为 5%，而在 EGFR、KRAS、HER2 或 TP53 等基因无突变的 NSCLC 患者中，ALK 融合基因阳性率达 25%；我国 EGFR 和 KRAS 均为野生型的腺癌患者中 ALK 融合基因的阳性率高达 30%~42% 。病理形态学研究提示在含印戒细胞的粘液型或实性腺癌中，ALK的发生率高于其他类型的肺腺癌（46.2% vs 8%） ALK阳性的NSCLC虽然仅占全部NSCLC的5%，但是每年新发病例数在中国仍接近30,000例;目前检测 ALK 融合基因的常用方法主要有荧光原位杂交技术（FISH）、基于 PCR 扩增基础上的技术和免疫组织化学方法（IHC）。 FISH 目前仍是确定 ALK 融合基因的参照标准方法，但价格昂贵，操作规范要求较高，尚不适用于 ALK 阳性患者的筛查。 实时荧光定量 PCR 操作简便，敏感度高，但需要特定的试剂盒和仪器。 IHC 简便易行、价格便宜、操作方法成熟。VentanaALK 融合蛋白 IHC 诊断试剂盒在不影响特异度的前提下，进一步提高了敏感度，与 FISH 结果的吻合率达到 98.8%，可重复性达 99.7%，已经获 CFDA 批准用于诊断 ALK 阳性的 NSCLC 患者。;ALK??合基因阳性有效靶向药物;总结;谢 谢 ！