肌源干细胞可塑性研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３１（７）：１１４１２０ ? 檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 檪 综　　述檪 殏 檪 殏檪檪檪檪檪檪檪檪 肌源干细胞可塑性研究进展 武晓云　王世立 （山东省医药生物技术研究中心 国家卫生部生物技术药物重点实验室　济南　２５００６２） 摘要　目前已证实肌肉中至少存在两种干细胞：肌卫星细胞和肌源干细胞。肌源干细胞被认为 是卫星细胞的前体细胞，具有较高的增殖能力、更好的细胞生存能力和更宽的分化能力。肌源干 细胞不仅能够分化成血、肌肉、脂肪、骨、软骨、内皮等中胚层细胞，而且也能打破胚层限制分化成 外胚层和内胚层细胞。文章对肌源干细胞的分离纯化、鉴定、可塑性及临床应用做一综述。 关键词　肌源干细胞　可塑性　分离　分化　基因治疗　组织再生 中图分类号　Ｑ２ 　　肌肉组织取材广泛（肌肉组织占机体总质量的 肌较少涉及。ＭＤＳＣ取材主要是通过组织标本，采用机 ４０％～５０％），获取相对容易、安全。越来越多的研究 械剪切加酶消化法裂解围绕 ＭＤＳＣ的基膜，采用胶原 和临床应用已经将肌肉组织作为“理想”的干细胞来 酶、分散酶和胰蛋白酶联合分步消化，可使８０％～９０％ 源。肌肉中至少存在两种干细胞：肌卫星细胞和肌源 的ＭＤＳＣ释放。这种组织标本消化方法对组织有较大 干细胞（ｍｕｓｃｌｅｄｅｒｉｖｅｄｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＭＤＳＣ）。ＭＤＳＣ是肌 的破坏性，而且需要多种酶的消化，影响细胞增殖和分 卫星细胞的前体细胞，相对于卫星细胞，有更强的增殖 ［４］ 化活性。此外肌肉组织中ＭＤＳＣ数量极少 。因此建 能力和更宽的分化潜能，因而具有更广阔的应用前 立一种高效的ＭＤＳＣ的获取方法是目前国内外干细胞 ［１］ 景 。目前文献报道ＭＤＳＣ不仅可以分化成中胚层的 研究的热点，也是临床需要解决的一个难题。本实验 肌肉细胞、造血细胞、成骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、 利用生物材料探索一种新的、高效的ＭＤＳＣ获取方法。 脂肪细胞，也能打破胚层界限分化成内胚层的肝细胞 ［４］ ＭＤＳＣ常用的分离纯化方法主要有差速贴壁法 、密度 ［２３］ 合外胚层的神经细胞 。成体干细胞（ａｄｕｌｔｓｔｅｍｃｅｌｌ， 梯度离心法、流式细胞术、免疫磁珠法。如何获得高度 ＡＳＣ）打破胚层界限横向分化为无关类型的成熟细胞或 均一的干细胞是干细胞鉴定、分化、可塑性研究和应用 在特定环境下发生逆分化的这种特性称为干细胞的可 的关键。不少学者致力于研究 ＭＤＳＣ分离培养方法。 塑性。但这种多向分化能力是否是干细胞内在的可塑 但目前应用最广泛的仍然是差速贴壁培养法。这种 性还存在争论，这种可塑性机制也有待进一步澄清和 方法是利用非肌源性成分贴壁能力较 ＭＤＳＣ强的特 证实。 点，培养早期贴壁的细胞多属此类，经过预贴壁和一 １　ＭＤＳＣ的分离纯化 段时间的转瓶换液 （即移出未贴壁的 ＭＤＳＣ细胞悬 液接种于新的培养瓶中）重复操作直至 ＭＤＳＣ纯化。 ＭＤＳＣ来源于骨骼肌、平滑肌和心肌。但目前研究 此法虽然步骤繁琐，细胞污染的概率较大，细胞纯化 文献报道多采用骨骼肌来源的组织培养，心肌和平滑 耗时较长，但对细胞的损伤小且细胞的纯度