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金叶接骨木离体快繁的研究 　　摘要：以金叶接骨木的幼嫩茎尖为试材进行组织培养研究，建立其快繁体系。结果表明，芽诱导的最适培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ ４．０ ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ３ ０．２ ｍｇ／Ｌ，其萌芽率为９４．１７％；最适增殖培养基是ＭＳ＋６－ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．０５ ｍｇ／Ｌ，其增殖系数为６．１。生根培养基以ＭＳ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ ２．０ ｍｇ／Ｌ的长势最好，生根率达到了９７％。 　　关键词：金叶接骨木；茎尖；组织培养 　　中图分类号：S687；Q943.1文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11402－0416-04 　　 　　Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ Ｓａｍｂｕｃｕｓ canadensis L. ｃｖ． Aurea 　　 　　ＳＯＮＧ Ｘｕｅ－ｌｉａｎ，ＬＩＮ Ｙｉｎｇ，ＺＨＡＯ Ｈｅ－ｘｉａｎｇ，ＤＯＮＧ Ｒａｎ，ＧＵ Ｄｅ－ｆｅｎｇ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Tｈｅ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ ｔｈｅ Ｓａｍｂｕｃｕｓ canadensis L. ｃｖ． Aｕｒｅａ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｕｓｉｎｇ ｓｔｅｍ ａｐｅｘ ａｓ ｔｈｅ ｍａｔｅｒｉａｌ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ， ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｓｈｏｏｔ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｗａｓ ＭＳ ＋６－ＢＡ ４.0 ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ３ ０．２ ｍｇ／Ｌ， ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ９４．１７％； oｐｔｉｍａｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋６－ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．０５ ｍｇ／Ｌ， ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｗａｓ ６．１． Ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ ｗａｓ ＭＳ＋ＮＡＡ ０．１ｍｇ／Ｌ ＋６－ＢＡ ２ ｍｇ/Ｌ， ｇｒｏｗｔｈ ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｏｏｔｉｎｇ ｒａｔｅ ｗａｓ ９７％． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｓａｍｂｕｃｕｓ canadensis L. ｃｖ． Aｕｒｅａ； ｓｔｅｍ ａｐｅｘ； ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ 　　 　　在园林植物中，通常将呈现出不同程度的黄色叶片植物定为金叶植物，并冠名为Ａｕｒｅａ［１］，这类植物在园林景观色调上可起到良好的调节作用，因此，金叶接骨木开始在中国园林市场走俏。２００３年洛阳市、２００７年银川市先后引进了金叶接骨木，两地分别从药用价值和园林栽培的角度出发进行了研究，并证明了其具有广泛的园林应用前景和产业化开发潜力［２，３］。金叶接骨木的引进，为园林彩叶树种的应用添加了新的物种，也造就了市场上其苗木供不应求的局面。以往有人通过组织培养技术对金叶接骨木进行了快速繁殖［４，５］，对当地的金叶接骨木苗木供应紧张起到了有效的调节作用。本试验从繁殖快、成本低、见效快、性状稳四个角度出发，也采用组织培养技术对金叶接骨木进行了快速繁殖，希望以此满足金叶接骨木在吉林省的市场需求。 　　１材料与方法 　　１．１供试材料 　　所选材料是已发芽的金叶接骨木枝条，采枝时间为２００９年５月中旬至当年９月，主要以金叶接骨木的幼嫩茎尖为培养材料。ＭＳ、１／２ＭＳ和Ｎ６培养基按要求自配，所用的植物生长调节剂６－苄氨基嘌呤、吲哚乙酸、吲哚丁酸、赤霉素、６－糠氨基嘌呤、玉米素以及升汞、吐温－８０、活性炭等试剂或添加剂均为实验室自备。 　　１．２研究方法 　　１．２．１外植体灭菌在５月中旬枝叶稍展开时，选取３～５ ｃｍ长的幼嫩茎尖为外植体，先用自来水冲洗干净后剪去叶片，留茎尖３～４ ｃｍ，用流水冲洗１ ｈ左右，可加入少许洗衣粉除尘。接着在超净工作台上用无菌水冲洗３～４遍，放入０．１％的升汞中灭菌，并加入吐温－８０以加强洗涤效果。在升汞中灭菌６ ｍｉｎ后，再用无菌水冲洗５～６次，切掉茎尖基部，使茎尖长度控制在２ ｃｍ，然后接种于培养基中。 　　１．２．２芽的诱导把获得的无菌材料茎尖接种到不同的处理组合组成的诱导培养基中，进行芽的诱导。各诱导培养基的配比组合见表１。接种后置于培养室内光照培养，光照时间为１０～１２ ｈ／ｄ，光照强度为２ ０００ ｌｘ，培养室温度２５±２。每种处理接种１０瓶，每瓶接种４个初代外植体，重复３次；培养３５ ｄ后，观察其生长状态，统计其萌芽率、成活率及死亡率，以筛选出芽诱导的最适培养基。萌芽率＝×１００％；成活率＝×１００％；死亡率＝×１００％ 　　１．２．３芽的继代与增殖经过芽的诱导后，切取健壮植株的茎尖，接种到增殖培养基中，各增殖培养基的配比组合见表２。每处理接种１０瓶，每瓶