第3章 基因突变和损伤DNA的PPT.ppt

一. 光复活作用（光修复） ?光复活作用 经紫外线照射后的微生物暴露于可见光下时，可明显的降低其死亡率的现象称为光复活作用。 原因：是可见光所激活的酶在起作用。 经紫外线照射后形成胸腺嘧啶二聚体的DNA分子，在黑暗中会与一种光激活酶结合形成复合物，当再暴露在可见光下时，复合物会因获得光能而使酶与DNA分子解离，从而使胸腺嘧啶二聚体重新分散成两个胸腺嘧啶单体，同时光激活酶也从复合物中释放出来。 phR 471aa photo reactivation ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- ----TT---- ----AA---- Before replication Error-free 400 nm Blue light phR gene (photo-reactivation enzyme) 可见光激活 由于微生物中一般都存在着光复活作用，因此用紫外线照射菌液时，要在红灯下进行操作处理，然后再于暗室中或用黑布包起来培养。 二.错配修复 甲基化引导的错配修复系统： 特异性不强。能修复DNA双链结构的任何轻微损伤。重大损伤靠其他方式修复。 三、切补修复（复制前修复） 包括3个步骤：损伤部位的识别；损伤部位被切除；完成修复。 修复过程需要的酶不需要光的激活，所以叫暗修复。但是黑暗不是必要条件。 能修复紫外线引起的损伤，也能修复电离辐射和化学诱变剂造成的损伤。 包括两个类型：核苷酸切除修复、碱基切除修复。 修复过程p50图4－15 整个修复过程是在四种酶的协同作用下进行的将胸腺嘧啶切除的?DNA损伤修复：核酸内切酶胸腺嘧啶在胸腺嘧啶二聚体的5’一侧切开一个3’-OH和5’-P的单链缺口；核酸外切酶从5’-P至3’-0H方向切除二聚体；cDNA聚合酶以DNA的另一条互补链作模板，从原有链上暴露的3’-0H端起逐渐延长，重新合成一段缺损的DNA链；通过连接酶的作用，把新合成的那段DNA?的3’-OH末端与原来的5’-P末端相连接，形成一个完整的双链结构。 四. 重组修复 P51图4－16 必须在DNA进行复制的情况下才能进行，复制后损伤才得以修复，因而又叫复制后修复。 重组修复可以在不切除胸腺嘧啶二聚体的情况下，以带有二聚体的这一单链为模板而合成互补单链，可是在每一个二聚体附近留下一个空隙。一般认为通过染色体交换，空隙部位就不再面对着胸腺嘧啶二聚体而是面对着正常的单链，在这种情况下DNA多聚酶和连接酶便能起作用而把空隙部分进行修复。? 母链中的损伤部位并未被切除，损伤部位的切除仍需要再一次的切除修复，或经一定代数的增殖以后损伤的部位逐渐被稀释，最终不影响细胞的正常生长和繁殖。 重组修复 五、交联修复 两条链上的碱基通过共价键结合在一起。许多理化因子可以造成交联。核苷酸切除修复与重组修复结合起来能修复这种损伤。上述方法单一使用不能修复。 较大面积达重大损伤用这种方法修复。 许多能造成DNA损伤或抑制复制的处理会引发细胞内一系列复杂的诱导反应，成为应急反应（sos)。 SOS修复允许新生的DNA链越过胸腺嘧啶二聚体而生长，但使保真度降低。是一个错误潜伏的过程。所以这种方法是生物在不利环境下求生的一种功能。 六、紧急呼救(SOS)修复系统? 这是细胞经诱导产生的一种修复系统。它的修复功能依赖于某些蛋白质的诱导合成，而且这些蛋白质是不稳定的。SOS修复功能和细菌的一系列生理活动有关，如细胞的分裂抑制、λ噬菌体的诱导释放，以及引起DNA损伤的因素和抑制DNA复制的许多因素都能引起SOS反应。 倾向错误的sos修复 适应性修复机制 细胞壁 蛋白质.氨基酸干扰酶活性因素 体内修复系统 分离.生理延迟 诱导剂进入细胞 诱导剂接触细胞质 造成前突变 引起突变 突变表现型的表现 第六节 诱变剂和诱变机制 凡能提高突变率的任何理化因子，都可称为诱变剂。突变率比自发突变的频率要高。 常用诱变剂有两大类：物理诱变剂和化学诱变剂。 常用的物理诱变剂有紫外线、x射线、γ射线(如Co60等)、等离子、快中子、α射线、β射线、超声波等。 常用的化学诱变剂有碱基类似物、烷化剂、羟胺、吖定类化合物等。 一、物理诱变剂 物理诱变剂也叫辐射，分为电离辐射和非电离辐射。 （一）电离辐射的诱变作用 电离辐射(如X射线、γ射线等)后带有较高的能量，能引起被照射物质中原子的电离，故称电离辐射。 关于电离辐射的诱变作用机理还没有像那些化学诱变剂和紫外线那样清楚，因为电离辐射对生物作用的全过程是一系列很复杂的连锁反应过程。 电离辐射作用过程 现在通