大鼠肾小球足细胞原代培养及鉴定方法的研究.docVIP

大鼠肾小球足细胞原代培养及鉴定方法的研究.doc

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大鼠足细胞的原代培养及鉴定方法贾苗张益民赖德源中山大学孙逸仙纪念医院肾内科广州提要目的建立一种重复性好操作简便的大鼠足细胞培养方法方法取重量的健康雌性大鼠无菌取肾后通过差异过筛法分别通过目目及目细胞筛网收集目筛网上肾小球进行接种利用植块法将接种培养面向上放置后将培养瓶翻转过来正常放置于的恒温恒湿培养箱进行孵育采用形态学观察和细胞间接免疫荧光技术对足细胞进行鉴定并用流式细胞仪进行足细胞纯度分析结果后可见绝大部分肾小球贴壁并有少许肾小球周围有细胞爬出可见所有肾小球周围有大量细胞爬出胰酶消化后传代培养

大鼠足细胞的原代培养及鉴定方法 贾苗,张益民,赖德源* (中山大学孙逸仙纪念医院肾内科,广州 510120) 提要: 目的 建立一种重复性好、操作简便的大鼠足细胞培养方法。方法 取重量200-220g的健康雌性SD大鼠,无菌取肾后通过差异过筛法分别通过80目、150目及200目细胞筛网,收集200目筛网上肾小球进行接种,利用植块法将接种培养面向上放置,4.5h后将培养瓶翻转过来正常放置于37℃、5%C02的恒温恒湿培养箱进行孵育。采用形态学观察和细胞间接免疫荧光技术,对足细胞进行鉴定,并用流式细胞仪进行足细胞纯度分析。结果 5d后可见绝大部分肾小球贴壁并有少许肾小球周围有细胞爬出

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