[理学]生物工艺学胡庆森编_安徽科技.ppt

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[理学]生物工艺学胡庆森编_安徽科技

第一节 酶活性调节 1.定义:蛋白质分子中的一个或者多个氨基酸残基与一化学基团共价连接或者解开,使其活性改变的作用。 2.化学基团:磷酸基、甲基、乙基、腺苷酰基。 蛋白质的共价结合部位:一般为丝氨酸残基上的羟基(-CH2OH)。 3.共价修饰的分类:可逆共价修饰、不可逆共价修饰。 a、 可逆共价修饰 大多数共价调节是通过特定部位的丝氨酸、苏氨酸的侧链(-OH)的磷酸化和去磷酸化来调节的。 b、 不可逆共价修饰 酶原:必须在一定条件下,去掉一个或者几个特殊的肽键,从而使酶的构象发生一定的变化才有活性。 酶合成调节:主要指通过调节酶合成的量来控制微生物代谢速 度的调节机制。 这类调节是在基因水平(原核生物主要在转录水平上)上进行。 诱导作用的分子机制(P70): Jacob与 Monod 最先提出诱导作用模型,也叫操纵子模型。 定义:培养基中某种基质的存在会减少(阻遏)细胞中其相应酶的合成速率,这种现象称为分解代谢物阻遏。 现象:若微生物的培养基中存在一种以上可利用的养分,通常它们会先分解那些最易利用的基质,只有该基质耗竭后才开始分解第二种基质(如大肠杆菌在葡萄糖和乳糖上混合碳源中生长)。 ⑥一簇抗生素中各组分的多少取决于遗传因素和环境因素; 5、培养基设计中需要注意的一些问题 确保培养基的设计符合稳定和大规模发酵产品的需要 (1)原料及设备的预处理 a. 发酵培养基所用的原料,有时候必须经过适当的处理。 糖蜜中含有大量的无机盐(如Fe3+)、胶体物质和灰分 柠檬酸发酵:有极大的影响(预先加入黄血盐,除去铁离子) b.工业上一般使用铁制发酵罐 (溶液中铁离子浓度30 μg/mL) 青霉素发酵最适铁离子浓度控制在20 μg/mL以下 在发酵罐内壁涂上生漆或耐热环氧树脂做保护剂,防止铁离子脱落 酵母生产或酒精发酵:稀释、酸化、灭菌、澄清添加营养盐处理后才能使用。 (2) 原料的质量 绝大部分产品发酵培养基中关键的调控因子尚不清楚,有一部分调控因子 为微量物质,它们存在于碳源、氮源中。这些物质(碳源、氮源)的质量 (成分、含量)的稳定性成为获得连续、稳定高产的关键。 培养基中的有机氮源特别要注意原料来源、加工方法、有效成分含量、储存方法 热轧黄豆饼粉和冷炸黄豆饼粉中主要成分比较(%) 红霉素发酵 链霉素发酵 → → (3) 发酵特性的影响 建立培养及质量标准、定点采购和加工,不能随意更换(如有更换,需事先试验) 抗生素发酵过程中的“稀配方”(成本、溶氧、下游处理) 淀粉浓度过高,需要先用淀粉酶糊化,在灭菌,以免产生结块。 (4)灭菌 发酵培养基目前使用湿热蒸汽灭菌法 灭菌条件的差异造成培养基成分差异 措施:大规模发酵中尽可能采用连续灭菌 b. 不恰当的灭菌条件还可能带来有害物质的积累,影响抑制产物合成 措施:避免营养物质加热条件下相互作用,采用营养物质分开灭菌 葡萄糖类化合物易于氨基化合物发生美拉德反应,分开灭菌 Ca 2+与磷酸盐分开灭菌,防止形成沉淀 易挥发或热敏性物质,采用过滤除菌 1、培养基按其组成物质的纯度、状态、用途各自可分为哪几类? 生理酸性物质、生理碱性物质 DE值 前体 理解生长因子、前体和产物促进剂的区别,给出实例能判断出该物质属于哪一类 简述培养基成分选择的原则(四点) 简述培养基设计的步骤 熟练掌握极差分析法分析正交试验的结果(计算题) 理解孢子培养基、种子培养基和发酵培养基营养成分的差异 第三章:微生物培养基 培养基:广义上讲培养基是指一切可供微生物细胞生长 繁殖所需的一组营养物质和原料。同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件。 发酵培养基的作用: 满足菌体的生长 促进产物的形成 微生物的营养活动,是依靠向外界分泌大量的酶,将周围环境中大分子的蛋白质、 糖类、脂肪等营养物质分解成小分子化合物,再借助于细胞膜的渗透作用,吸收 这些小分子营养来实现的。  第一节 培养基的类型及功能 培养基按其组成物质的纯度、状态、用途可分为三大类型 一、按纯度 合成培养基 : 原料其化学成分明确、稳定 适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律 培养基营养单一,价格较高,不适合用于大规模工业生产 天然培养基(复合培养基): 采用天然原料 原料来源丰富(大多为农

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