微生物的染色和形态观察.ppt

一、目的要求 ——学习微生物涂片、染色的基本技术 ——认识细菌和形态特征 ——巩固显微镜（油镜）的使用方法及生物作图要求 二、基本原理 三、器材： ——菌种：分离纯化的菌株、枯草芽孢杆菌 ——试剂：结晶紫染液 ——其他器皿及用具：显微镜等 操作步骤 一、涂片： ——无菌操作 ——滴的生理盐水的量不能太多 ——菌不能加太多，涂布要均匀 操作步骤 二、干燥和固定 三、染色 四、水洗 五、干燥：不能擦 操作步骤 六、镜检 ——必须完全干燥后才能用油镜观察 ★油镜使用原理及注意事项 操作步骤 操作步骤 1、低倍镜观察（寻找观察目标）。 2、高倍镜观察（选取理想的观察目标）。 3、油镜观察：高倍镜观察后- 上升镜筒-油镜转至正下方，在载玻片上加一小滴油-小心地下降镜筒使镜头浸在油里-用粗螺旋将镜筒缓慢上升，寻找目标（物象）用细螺旋调节，使物象清晰-观察记录。最大光圈 操作步骤 4、观察完毕。上升镜筒，转动物镜转换器，使油镜物镜偏位。用干净擦镜纸擦去镜头上的油迹，再取一张擦镜纸醮上二甲苯擦去镜头上残留的香柏油，最后再用一张干净的擦镜纸擦去残留在镜头上的二甲苯。 5、将显微镜各部分还原，放回箱中。 结果与分析 ★结果 ——根据观察结果，绘细菌形态作图 思考题 （1）为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察？ （2）如果涂片未经热固定会出现什么问题？如果加热温度过高、时间过长又会如何？ 下一个实验 细菌的革兰氏染色和芽孢染色 * * 微生物的染色和形态观察 ——细菌的简单染色法 基本原理 ★细菌个体微小，且较透明，必须借助染色法使菌体着色，与背景形成鲜明的对比，以便在显微镜下进行观察。 ★根据实验目的不同，可分为简单染色法、鉴别染色法和特殊染色法等。 ★简单染色法是最基本的染色方法，是利用单一染料对细菌进行染色。此法操作简便，适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。 基本原理 ★常用碱性染料进行简单染色，因为细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时其分子的染色部份带正电荷，易与细菌结合使细菌着色。 滴加少量水 挑取菌体 涂片