BASi微透析仪使用大鼠脑探针套管的植入1BR大脑内引导套管.PDF

BASi 微透析仪使用 一、 大鼠脑探针套管的植入 1. “BR ”大脑内引导套管 （1） 使用橡胶O 形环轻扣在探针或引导管头的凹槽中，易于取下。 （2 ） 使用一个Ω （Omega ）环，可以转动到环的开口位置插入探针。当环再转动， 转过开口位置，探针就会在插入的位置被锁死，同样易于取下。（环为金属材质， 不适合核磁共振） （3 ） 小鼠探针一压一插就锁住 2. 将引导套管连在立体定位仪上。 3. 固定大鼠头部 （1） 麻醉大鼠，然后固定在脑立体定位仪上，主要是固定鼻端和两耳部位，固定后 大鼠的头部是不能动的。注意定位仪主杆上的旋转的标尺定在0 处。 （2 ） 立体定位仪的耳杆可以换成45 度钝的，这样不会顶破鼓膜。也可以顶在耳下的 凹陷处。固定时注意耳杆上的标尺左右距离要对称。固定好的标准：提尾巴不 会掉，而且头能以耳杆为轴用手摁动。 （3 ） 固定上颌部：旋松调节槽上“固定旋钮”，使整体向大鼠头部移动。调节“压环 旋钮”使压环上移，将动物的上门齿钩住门齿板的前杆，使门齿根部紧靠杆的 上缘。旋松调节槽上“固定旋钮”，在主框上前后移动至头自然伸展、然后固定； 下移“压环旋钮”，夹紧头部。根据大鼠脑定位图谱，调节门齿板角度至图谱要 求的水平。（先调角度再压紧压环。调节角度是压环前面的螺丝？） （4 ） 剪去大鼠头顶部毛，皮肤表面消毒，然后根据需要纵向或者横向剪开皮肤。前 面剃到两眼之间，后面剃到两耳之间。可用3 ％双氧水烧开组织。 （5 ） 用棉球和眼科剪刀除去颅骨表面的脑膜，过一会颅骨干燥后找到前囟部位（靠 前部的十字交叉点），先将定位仪的三点定位前囟部位原点（确定其三点数值）， 参考定位坐标把引导套管移动到下针部位的上方，在颅骨相应的位置用签字笔 点一个原点，移开套管，用颅钻在下针部位转一个小孔。小心的用注射器针头 穿刺硬脑膜，注意不要穿刺到下面的脑组织，再将套管转回 （注意定位仪主杆 上的旋转的标尺定在0 处。），下针，并调节到确定的高度。 （6 ） 可以在旁边再开两个孔（形成三角形），上骨螺丝。不用很深，用来固定牙科水 泥。牙科水泥堆在探针白色塑料一半以下的位置，成锥形。等牙科水泥干后再 撤立体定位仪。牙科水泥要一层一层上，不要粘到金属锁扣上。 （7 ） 手术后打生理盐水、抗生素、止痛剂，五到七天后才能采集数据。 （8 ） 手术后的动物要求单独饲养，饲养环境中无栏杆和突出物。大鼠放到平顶的笼 子里面（整理箱） （9 ） 项圈固定在腋下穿过，留出一指空间。多余的剪掉。 二、 连接微透析仪 1. 将大鼠放入转笼中。用钩子勾住项圈。小鼠有小鼠的钩子。 2. 探针是黄进绿出。旋转Omega 环，取下套管封盖，插入探针，旋转Omega 环，锁定探 针。连接探针的管需要用切管器切断。从勾住项圈上水平臂的圆柱洞插入。 3. 连管路的接头：70 ％酒精泡10 分钟以上 4. 管路和接头需要先灌入液体 三、 注射泵使用 1. 插入注射泵，控制器连接电源，注射泵上的LED 缓慢闪烁 2. 调节灌流速度，控制器是以1ml 注射器为标准调节的。 3. 旋紧C 调节b 的位置，操作注射泵时，一定先旋松c 。 4. 安装注射器到注射泵上。注射器尾端要卡在靠近大螺丝滑块（c ）的卡口处（e ）。拧紧 滑块c 并推动至注射器推杆处，再拧松c 。 5. 探针使用前需要在无菌水中浸泡过夜（实验前灌流2 小时）或灌流（2 ul/min）过夜， 洗到外甘油。用后需要用洗蛋白的清洗液（不用有机溶剂），之后再用纯水灌流（小于 5 ul/min）半小时，放在探针架上放入无菌水4 度保存。 6. 体外回收率测定：需要用探针架上，试管装标准液，用脑脊液灌流，计算 四、 样片收集器 1、开启收集器后，机器本身会进行自检，并将针和孔对齐。每次取下收集器盘子时都需要 开关机一次。 2、ENTER 键进入