植物检疫性病害的检测及防除研究方法技术演示幻灯片.ppt

绪 论;一 检疫（QUARANTINE);;;外来有害生物的危害;导致外来有害生物大爆发的因素;动植物检疫的目的;;马铃薯晚疫病;葡萄根瘤蚜;地中海实蝇;广肩星天牛;植物检疫的起源;;国际植物保护公约的产生;国际动物卫生组织的产生;2001年4月;;进出口商品检验（INSPECTION);;;;致病微生物;药物残留;;生鲜牛乳收购标准;农作物农药残留;可乐风波;;绿霉素;硝基呋喃;盐酸克伦特罗;孔雀石绿;硫丹;苏丹红1号;重金属超标;检疫对象;第二章 植物检疫程序;;入境植物检疫程序;;;;;;;;;出境植物检疫程序; 出入境集装箱检疫;交通工具和人员检疫;植物检疫工作流程;报检员;自理报检单位;;;代理报检单位;报检员资格;报检员资格;;;;;对检疫检验技术的要求;检验检疫的样品;取样方法的依据;样品数量（容量）大小依据;检验检疫的方法;;;;第一节 植物病原真菌的检验检疫技术;一、直接检验 ;二、过筛检验 ;三、比重检验法;四、染色检验法 ;洗涤检验法;洗涤检验的操作程序;影响洗涤检验的因素;保湿萌芽检验法 ;沙内萌芽检验 －主要用于植物繁殖材料的入境后隔离检疫。供试材料种植在经过高压蒸汽灭菌处理或干热灭菌的沙砾、石英砂中，在隔离场所和适宜条件下栽培，根据幼苗和成株的症状鉴定。 土内萌芽检验 试管幼苗症状测定 －在试管中水琼脂培养基斜面上播种种子，在适宜条件下培养，根据幼苗症状、结合病原菌检查，确定种传真菌种类。生长检验花费时间长，使其应用受到限制。;保湿培养检验 ; 培养皿;吸水纸培养检验法实例;种子;七、分离培养检验;分离培养检验方法;分离培养检验步骤 ;研究方法;第二节 病原细菌的检疫检验技术 ;田间诊断――了解病害和寄主的群体特征，即病害在田间发生的情况，以及当地的作物栽培及耕作情况 。 初步诊断――通过肉眼观察植株的症状、病原分泌物以及镜检观察。 例如 水稻细菌性条斑病－取一小块病叶组织，低倍镜下观察，微管束有喷菌现象。 ;进一步诊断 ;提取液系列稀释;;接种方法;操作：细菌溢脓或分离纯化细菌――自然或人工接种――观察 ;生理生化及快速测定法;噬菌体检测;噬菌体法的主要优点是简便、快速，能直接用种子提取液测定。 缺点是非目标菌多量存在时敏感性较差，噬菌体的寄生专化性和细菌对噬菌体的抵抗性都可能影响检验的准确性。 ;取10g稻种，脱下谷壳，剪碎或磨碎， 放入已灭菌处理的烧杯中;酶联免疫吸附技术(ELISA)-- 酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunology assay, ELISA)是把抗原、抗体的免疫反应和酶的高效催化反应有机结合而发展起来的一种综合技术。;血清学检测技术;双抗体夹心法;间接法;竞争法;免疫荧光技术;免疫荧光技术;诊断试剂盒;分子检测技术;分子检测技术;特异性基因或DNA序列用于检测病原菌;核糖体DNA基础的PCR策略;分子检测试剂盒;研究方法;第三节 植物病毒检验检疫技术;非典型肺炎”元凶冠状病毒;生物学检测技术 ;电子显微镜观察;免疫学检测法;快速免疫滤纸测定法(Rapidimmuno afterpaperassay,RIPA);免疫胶体金技术(Immune?colloidal?gold?technique);免疫用抗原来源;单克隆抗体的制备;多克隆抗体的制备;分子生物学检测方法 ;多聚酶链式反应(PCR);反应前：“分子信标”为一发夹型探针，探针的柄部两端序列互补，使其呈发夹状，环与靶序列互补。位于柄部的５’和３’端分别标记荧光染料和猝火剂。在发夹关闭时，荧光染料和猝灭剂极端靠近，荧光几乎完全被猝灭;变性：“分子信标”柄部因高温变性而呈???曲状，荧光染料远离淬灭剂，发出荧光;退火：“分子信标”发夹环部因与靶序列互补而杂交，“分子信标”发夹完全展开，发出荧光：如无靶序列存在“分子信标”因柄部序列互补回复发夹，无荧光;延伸：“分子信标”因升温与靶序列脱离，延伸反应顺利进行;反应结束：“分子信标”与扩增产物杂交发出荧光，荧光强度与扩增产物量成正比;杂交诱捕PCR-ELISA原理;实时荧光PCR原理 ;核酸斑点杂交技术;分子生物学和免疫学相结合检测方法;研究方法;第四节 植物病原线虫的检疫检验技术;罹病样品的采集及保存方法;植物寄生线虫的各种分离方法; 简易贝尔曼漏斗法:分离少量植物材料中有活动能力的线虫。;;;线虫的杀死固定技术;检疫性线虫的一般检验程序及注意事项;注意事项;研究方法;检疫处理的原则和方法;除害方法——机械处理;除害方法——熏蒸处理;除害方法——化学处理;除害方法——物理处理;避害处理——限制卸货地点和时间;避害处理——改变用途;避害处理——限制使用范围和加工方式;退回和销毁;You are dismissted ！ Bye bye ！