[农学]生物化学第3435.pptVIP

二、DNA的损伤修复 DNA损伤发生的部位： 碱基、脱氧核糖、磷酸酯键 一级结构的变化又会导致二级结构（双螺旋）遭到破坏。 DNA损伤会引起生物突变，甚至导致死亡。在一定的条件下，生物机体能使其DNA的损伤得到修复。修复是生物在长期进化过程中获得的一种保护功能。 DNA损伤修复的种类 （一）错配修复 Dam甲基化酶可使DNA的GATC序列中的腺嘌呤N6位甲基化。复制后DNA在短期内（数分钟）为半甲基化GATC序列。 细胞错配修复系统能够区分“旧链”和“新链”。一旦发现错配碱基，即将未甲基化的新链切除，并以甲基化的旧链为模板进行修复合成。 错配修复 错配修复 （二）直接修复 嘧啶二聚体的光复活 暗修复 光复活酶在生物界广泛分布，但不存在于哺乳动物体内。 高等动物更重要的修复方式是暗修复： 切除含嘧啶二聚体的核酸链，再重新合成。 O6-甲基鸟嘌呤的修复 （三）切除修复 单个碱基缺陷采取碱基切除修复方式。 细胞内识别不正常碱基的酶： DNA糖苷酶 DNA糖苷酶识别并水解不正常碱基。失去碱基的部 位称无嘌呤或无嘧啶位点（AP位点）。 AP位点形成后，AP核酸内切酶在AP位点附近切开DNA链，然后核酸外切酶（ DNA聚合酶Ⅰ）将AP位点在内的DNA链切掉。DNA聚合酶Ⅰ和DNA连接酶补上缺口。 2、核苷酸切除修复 DNA损伤造成双螺旋结构有较大变形时采取这种修复方式。 修复时利用切除酶（一种内切酶）在损伤部位的两侧切开，除去错误片段，再合成出正确的序列。 切除修复 （四）重组修复 重组修复 （五）应急反应（SOS）和易错修复 易错修复 SOS反应诱导的两种修复系统： 避免差错的修复：错配修复、直接修复、切除修复、重组修复 易产生差错的修复：易错修复 易错修复就是利用没有校对活性的DNA聚合酶进行复制，碱基不配对也继续复制，结果产生出高突变率。 SOS系统可诱导多种与修复相关的酶和蛋白的产生，包括缺乏校对功能（3’核酸外切酶活性）的DNA聚合酶（如E.Coli中的DNA聚合酶Ⅳ和Ⅴ）的产生。 SOS反应的机制 SOS反应产生的结果：损伤的DNA复制和产生变异 SOS反应是生物处在不利环境下产生的，对生物进化具有重要意义。 对高等动物致癌的诱变剂都可以在微生物中引起SOS反应，因此在相关研究研究上具有实际意义。 三、DNA的突变 （一）突变的类型 突变的类型 （二）诱变剂的作用 一、同源重组 二、特异位点重组 三、转座重组 DNA分子内或分子间发生遗传信息的重新组合称为遗传重组。 基因重组发生的时期和方式： 真核生物：减数分裂前期同源的染色体交换 原核生物：可通过多种形式进行重组 重组发生的意义： 增加群体的遗传多样性； 分开有利突变和不利突变； 通过优化组合积累有意义的遗传信息； 参与其它重要的生物学过程，如重组修复、基因表达调控等。 两条同源DNA分子通过配对，链的断裂和再连接产生片段交换的过程。 关于同源重组过程的Holliday模型： ⑴ 两个同源染色体的DNA整齐排列 ⑵ 一个DNA分子的一条链断裂并与另一分子的对应链连接形成连接分子，即Holliday中间体 ⑶ 通过分支移动产生异源双链DNA ⑷ 中间体切开并修复形成两个重组DNA 对Holliday模型的修正： 重组是由双链断裂启动，而不是单链断裂。 同源重组的分子基础： 碱基配对，通过配对找到正确位置，进行链的交换。 两个DNA分子只要含有一段碱基序列大致相同的同源区，就可以发生重组。 细菌基因转移的四种机制： 结合 转化 转导 细胞融合 4.细菌细胞融合 用溶菌酶除去细菌的细胞壁，人工促使原生质体融合，可引起广泛的重组。 依赖RecBCD起始的重组模型 RecBCD的多种酶活性： 依赖ATP的核酸外切酶、核酸内切酶和解螺旋酶活性 DNA断裂时，它结合在其游离端，使其解旋并降解，直至酶移动到chi位点（GCTGGTGG)，产生3＇游离单链，随后单链与RecA结合，开始同源区重组。 3.转座子对生物体的影响 一、同源重组 真核生物减数分裂前期同源染色体之间的片段交换