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人工干扰载体构建及稳定细胞株系的获得与鉴定黄科喻胜鹏胡宗凯傅景曙李伟董世武谢肇重庆第三军医大学西南医院骨科国家地方联合工程实验室全军矫形外科中心摘要目的构建基因干扰载体获得人工干扰载体和稳定细胞株系检测其对间充质干细胞细胞成骨分化的影响方法设计特异性干扰小鼠基因的人工序列构建干扰载体将其转入细胞获得稳定细胞株用诱导后采用荧光定量和印迹检测和成骨标志基因表达水平结果成功构建成骨转录因子的干扰载体并获得了稳定细胞株系成骨标志基因的表达水平明显下降而下降不显著这对后续研究成骨转录因子和间结合力奠定了基
Cbfβ人工miRNA干扰载体构建及稳定细胞株系的获得与鉴定
黄 科1，喻胜鹏1，胡宗凯1，傅景曙1，李 伟1，董世武2，谢 肇 （400038 重庆，第三军医大学：西南医院骨科，国家地方联合工程实验室，全军矫形外科中心2）
[摘要] 目的 构建Cbfβ基因干扰载体，获得Cbfβ人工miRNA干扰载体和稳定细胞株系，检测其对间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化的影响。方法 设计特异性干扰小鼠Cbfβ基因的人工miRNA序列，构建Cbfβ干扰载体Blockit miRNA-cbfβ-miRNA1/miRNA2，将其转入C3H10T1/2细胞获得稳定细胞株；用BMP-2诱导3 d
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