银屑病易感基因HLA－Cw冰0602的构建-中国药理学通报.PDFVIP

Bulletin2008 ·1107· 中国药理学通报ChinesePharmacologicalAug；24(8)：1107-9 银屑病易感基因HLA-Cw冰0602的构建 朱健平，袁媛，刘霞，祁兢晶 (广东医学院药理学教研室，广东东莞523808) 758．630．26 中国图书分类号：R378．21；R394．2；R 与大多数种族的银屑病相关旧61。本试验旨在构建HLA．cw 107—03 文献标识码：A文章编号：1001—1978(2008)08—1*0602基因，为进一步制备银屑病动物模型、研究银屑病发 s 摘要：目的扩增银屑病易感基因HLA—Cw0602，为进一 生机制奠定基础。 步利用该易感基因制备银屑病转基因动物模型提供试验基 l材料与方法 础。方法 以银屑病患者全血基因组为模板，用HI．A—Cw书1．1材料 0602特异性引物筛选含有该基凶的阳性模板，根据HLA—Cw 1．1．1标本、载体、菌株与引物银屑病患者血液标本采集 t0602基因全长序列设计引物，利用聚合酶链式反应，扩增 自广东医学院附属医院皮肤科门诊。克隆载体pMD一19T Vec— 出相应基因片段，并克隆至质粒载体pMD一19TSimple Simple tor。结果PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定结果显示HLA— DH5a，由广东医学院寄生虫学教研室提供。引物由上海生 Cw$0602基因构建成功。结论成功构建HLA—Cw木0602 工生物工程技术有限公司及广州英骏生物技术有限公司合 基因，为后续银屑病转基因动物的制备奠定基础。 成。 1．1．2 主要试剂PCR扩增试剂、限制性内切酶，购自 关键词：银屑病；易感基因；HLA-Cw$0602 银屑病是一种多诱因导致的慢性复发性皮肤病，临床症 司；核酸分子标准品Markerti和MarkerIV，购白天根生化科 状以皮疹上覆盖银白色鳞屑，剥开后有薄膜现象和点状出血 技有限公司。 为主要特征…。银屑病属高发病种，全球范围内该病患者已 1．2方法 愈两f万，且发病率呈持续升高的趋势拉jJ。国内外有众多 1．2．1人HLA．Cw宰0602基因的筛选 学者长期从事该病的研究工作，关于它的发病机理也提出了 1．2．1．1人全血基因组的抽提新鲜抗凝血液加入等体积 众多假说。近年的研究显示，银屑病为一种遗传相关性疾 000 灭菌双蒸水，12 r·min“离心8min后弃上清，加入 病H1，该病的发生与某些人类白细胞抗原(HLA)具有高度 tool·L“碘化钾，漩涡混匀后再加入适量灭菌生理