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杂交育种 诱变育种 单倍体育种 多倍体育种 原理 常用方法 优点 缺点 基因重组 基因突变 染色体变异(成倍减少) 染色体变异(成倍增加) 杂交 用物理或化学方法处理生物 花药离体培养→单倍体→秋水仙素处理→纯种 秋水仙素处理 使位于不同个体的优良性状集中于一个个体上 提高变异频率 加速育种进程 有利变异少,需大量处理供试材料 明显缩短育种年限,育种时间较短。 技术复杂,需与杂交育种配合 各种器官大、营养成分高、抗性强 与杂交育种配合;获得的新品种发育延迟 育种时间最长 能产生人胰岛素的大肠杆菌 基因“嫁接” 能发光的水母 能否能否让热带鱼也能发光? 设想 不能发光的热带斑马鱼 能发光的热带斑马鱼 基因工程及其应用 第2节 什么叫基因工程? 基因工程:即 。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里, 地改造生物的 。 原 理: 操作水平: 结 果: 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。 基因拼接技术或DNA重组技术 定向 遗传性状 二、基因工程的基本操作步骤: 四步曲: 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合(核心) 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测和表达 1、基因工程的 指“ 限制性核酸内切酶 ” 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子 特点: “ ” 黏性末端 黏性末端 EcoRI限制酶的切割 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 平末端 平末端 SmaI限制酶的切割 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。 1、限制酶作用的位点在哪里? 2、被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端? 3、不同的限制酶呢? 思考: 形成的黏性末端相同 具有 磷酸二酯键 2、基因工程的 指“DNA连接酶” “ ” 作用: 将互补配对的两个粘性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子 两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作用 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来, 注意:DNA连接酶可连接双链DNA中的DNA单链缺口,但不能连接单链DNA! DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗? T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来,但效率较低 DNA连接酶的缝合作用 DNA连接酶的作用位点是:相邻的两个脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖。即生成:磷酸二酯键。 3、基因的运载体 常用 的运载体: 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 (1)运载体的概念 作为载体的必要条件 1.能自我复制 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达; 2.有一个至多个限制酶切位点 能与目的基因结合 3.有遗传标记基因 便于观察 4.对受体细胞无害、易分离 安全、比较容易得到 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是细胞染色体外能够自主复制的很小的环状DNA分子. 它们的共同特点是 都有侵染或进入宿主细胞的能力 大量的受体细胞接受不同的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 1、基因工程与作物育种 抗虫转基因植物 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 2、基因工程与药物研制 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。 微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。 胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。 将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%! 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 通常一种假单孢杆菌只能分解石油中的一种烃类.用基因工程培育成功的“超
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