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2.2 动物细胞工程 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法? 促进融合的方法? 融合完成的 标志 植物细胞B 植物体细胞杂交 有些细胞的融合是正常的生命活动。如 受精作用 动物细胞融合实例1 受精作用 动物细胞融合实例2 荧光标记的鼠细胞和人细胞融合示意图 1970年,有两位科学家做了一个人——鼠细胞融合的实验,以证实细胞膜的流动性。那么,如何实现人---鼠细胞的融合,动物细胞融合后有什么意义? 教学过程 一、动物细胞融合 1.动物融合的过程 请同学们阅读课本P52动物融合 思考: 1.什么叫动物细胞融合? 2.动物细胞融合的结果是什么? 3.细胞融合原理是什么? 4.促进细胞融合的方法有哪些 ? 不同DNA的两个细胞 灭活病毒诱导细胞融合 融合后的细胞进行有丝分裂 1 .过程 一、动物细胞融合 (细胞杂交) 一、动物细胞融合(细胞杂交) 2 .概念: 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 3 .结果: 形成单核的杂交细胞 4 .原理: 细胞膜的流动性 5 .诱导方式 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇(PEG) 生物法:灭活的病毒 6 .意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。(种间、属间、科间、动植物之间) 7 .应用:成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段. 生物种类 细胞来源 成功年代 酵母菌—鸡 原生质体—血红细胞 1975年 人—胡萝卜 腹水癌细胞—原生质体 1976年 人—小鼠 纤维肉瘤细胞——畸胎瘤细胞 1978年 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 单克隆抗体 读下面一段文字资料,找出单克隆抗体的概念 人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。 单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质 单一特异性强的抗体 阅读课本P52最后一段和P53的第一段,思考回答问题。 抗体是由何种细胞产生的? 2.抗体是如何产生的? 3.传统制备抗体的方法是什么,及缺陷? 4.B淋巴细胞有什么特点 ? 抗体是由何种细胞产生的? 2.抗体是如何产生的? 知识回顾 单克隆抗体 3.传统制备抗体的方法是什么,及缺陷? 方法:向动物体内反复注射某种抗原, 使动物产生抗体,从血清中分离 所需抗体。 缺陷:产量少、纯度低、特异性差 4.B淋巴细胞有什么特点? 动物在免疫过程中产生的抗体种类可达百万种 每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 但是: 一个B淋巴细胞在体外不能无限增殖 . . 提示1:对B细胞进行细胞培养可行吗? 提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的? 提示3:从诱变育种、基因工程、细胞工程等 角度有哪些可能的设计思路? 5.如何大量生产单克隆抗体? 单克隆抗体 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒极富创造性实验解决这个问题 单克隆抗体 阅读课本P53~54单克隆抗体制备的文字及示意图,再思考回答问题。 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案: 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体, 又能大量繁殖的细胞 单克隆抗体 两位科学家极富创造性的设想是什么? B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 (只考虑两两融合)融合细胞几种类型?培养液中细胞有几种类型? 3种 骨髓瘤细胞--骨髓瘤细胞 B淋巴细胞-- B淋巴细胞 B淋巴细胞--骨髓瘤细胞 5种 B淋巴细胞、骨髓瘤细胞 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交瘤细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 将不同杂交细胞分开,克隆专一抗体, 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 2 .单克隆抗体的制备过程 第1次筛选目的:得到杂交瘤细胞(多种)。 第2次筛选目的:在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性,既能产生专一抗体又能无限增殖。 杂交瘤细胞有何特点? 特异性强,灵敏度高 2.制备过程: 诱导其融合的方法有哪些? 注射抗原
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