又比氨基酸的大蛋白质结构复杂.ppt

* * * * * * * 胰岛素多聚体及单体 药用制剂中的胰岛素处于六聚体状态，主要由于浓度过高所致 六聚体外形似一个压扁了的球，直径约5 nm，高度约3.5 nm，由3个相同的二聚体组成 胰岛素注射至皮下后扩散至组织间隙液中，逐渐稀释，离解为二聚体及单体，然后透过毛细血管被吸收入血 血循环中的胰岛素处于单体状态，可直接发挥生物学效应 形成二聚体有关的主要部位为B链中氨基酸 B8、B9、B12、B16、B21、B23-29 B16、B23-25与胰岛素结合其受体有关，不能改变，否则影响生物活性 阻碍二聚体形成的策略 在聚合的界面引起一个电荷上的排斥状态 如B28脯氨酸(Pro)换为门冬氨酸(Asp) B28 Asp胰岛素(Novo-Nordisk) 模仿IGF-1的结构 B28 Pro B29 Lys换为B28 Lys B29 Pro Lispro insulin (Eli Lilly) [Lys (b 28), Pro (B 29)]-Human Insulin Analog (recombinant DNA origin) S S A-chain S S S S B-chain B28 LYS B29 PRO B26-30对于胰岛素结合于胰岛素受体的功能无关，但是对胰岛素形成二聚体有关的结构特点 。因此对此区段进行修饰将产生一些自聚合能力下降但是与胰岛素受体结合能力不变的新型速效胰岛素类似物 。 研制机理 已上市药物： Lispro（赖脯胰岛素）； Aspart（门冬胰岛素）； Apidra（赖谷胰岛素） Lispro （赖脯胰岛素 ，Humalog ? ）是第一个用于临床的速效胰岛素类似物,由美国礼来公司研制生产，将人胰岛素的B28与B29位的氨基酸对换。。 Aspart（门冬胰岛素，Novolog ? ）由丹麦诺和诺德公司研制生产，结构与人胰岛素的区别在于用天冬氨酸取代了B链28位上的脯氨酸。 APIDRA （赖谷胰岛素，Apidra ? ）安万特公司研制，以赖氨酸和谷氨酸分别取代了人胰岛素B3位的天冬氨酸和B29位的赖氨酸。 * 1.Humulin （优泌林） 重组人胰岛素 2.Novolin （诺和灵） 1982年10月在美国上市，全球第一 个商业化基因重组人胰岛素。 Eli Lilly and Company Novo Nordisk 作用时间： 皮下注射4小时以后起效 药效维持时间长于24小时 每日注射1次即可 不出现血清浓度高峰 同一患者注射后血浓度的个体内变异系数小 代谢作用明显强于促进细胞有丝分裂作用 降血糖效应等于或大于人胰岛素 不具面议原性 化学性质稳定 可与速效胰岛素或速效胰岛素类似物混合使用，不影响彼此药效 （3）长效胰岛素-人胰岛素类似物 ①甘精胰岛素（ glargine ）： 商品名Lantus? 甘氨酸替代胰岛素A链21位门冬氨酸、并在B链末端增加两个精氨酸。 ●使胰岛素结合更多带正电的氨基酸残基，改变等电点，使等电点由5.4上升至中性。这样，胰岛素类似物在酸性条件下可溶，在生理的近中性条件下结晶。 ②地特胰岛素（Insulin Detemir）：商品名Levemir ? 胰岛素B链29位赖氨酸侧链通过酰基化连接一个N-16-烷基酸的14碳游离脂肪酸 ●该游离脂肪酸能与白蛋白结合，延缓与胰岛素受体结合，从而延长其半衰期。 甘精胰岛素：Insulin glargine 重组DNA，人工合成 21A - Gly - 30 Ba - L - Arg 30B-L Arg - 人胰岛素 作用时间较NPH长： 等电位改变：生理pH中溶解性下降，六聚体稳定性上升 28周过程甘精胰岛素：(264) 睡前 NPH ：(270) 睡前 或 睡前+早餐前 Insulin Detemir （Levemir ? ） 诺和诺德公司研制 glargine （Lantus?） 安万特公司研制 ●辉瑞、万安特以及Nektar 共同研发 ●于2006.1.27被FDA批准 ●一种作用快的胰岛素干粉吸入剂 ●适用于餐前给药，其胰岛素吸收具有速效化的特征 * * * * * * * 动物组织/植物种子/叶片等一般使用高速组织到捣碎机；植物细胞具有坚硬的细胞壁，一般先用纤维素酶处理，细菌细胞先用溶菌酶处理，然后用超声波振荡/高速挤压或冻融交替等方法破碎。 * 生理活性物质易失活与降解，采集时必须保持材料的新鲜。防止腐败、变质与微生物污染。如胰脏采摘后要立即速冻，防止胰岛素活力下降。???????? 保存生物材料的主要方法有速冻、冻干、有机溶剂脱水，制成丙酮粉，或浸存于丙酮与甘油中等。 * * * 其