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实验一 大肠杆菌感受态细胞制备与质粒的转化 实验结果图 图1 空白对照 图2 质粒转化 实验材料： 大肠杆菌DH5ɑ 含抗氨苄基因的质粒（华南农业大学食品学院生物炼制实验室提供） 实验结果分析： 首先把含抗氨苄基因的质粒转化到大肠杆菌DH5ɑ感受态细胞中，再涂布接种到LB（含氨苄青霉素）培养基上培养。 图1是空白对照，此含有氨苄青霉素平板上接种的大肠杆菌中不含有抗氨苄基因的质粒，故平板中没有长出细菌。 图2是含抗氨苄基因的质粒转化感受态细胞后的涂布结果，可以看出，菌能够在含有氨苄青霉素的培养基上生长，这说明了质粒已经成功地转到了大肠杆菌感受态细胞中，大肠杆菌感受态细胞中含有抗氨苄的质粒，因此可以在含有氨苄青霉素的培养基上生长。 实验二 质粒 DNA 的提取和纯化 实验结果图： M 1 2 3 4 5 6 7 8 M 9 10 11 12 13 14 15 质粒DNA电泳图（注：M为marker3） 实验结果分析： 首先质粒有三种结构，分别是共价闭合环状DNA（超螺旋的SC构型），开环DNA（OC构型），线性分子（L构型），琼脂糖凝胶电泳中，不同构型的DNA具有不同的迁移率。本次实验大部分出现两条条带：前面的是SC型的质粒DNA，跑在后面的是OC型质粒DNA。接下来做酶切，所以需要SC型条带。 电泳图可看出，条带比较好的有12和14号，比较适合做下一步的酶切。我点的1号孔，虽然效果不是很理想，但可以做酶切实验。效果不好的原因可能是操作不当，实验过程振荡过剧造成的。 实验三 表达载体的构建 实验结果图： 酶切之后的电泳图（图中marker为marker3） 实验结果分析： 从电泳图可以看出，条带非常模糊，总体上来说实验是失败的。我们组点了一号孔，没有得到预期的结果。原因可能如下：操作不规范（这个可能性不大，不可能每个人都操作不当）；数码相机拍的照片清晰度不够；体系出了某些问题。 实验四 PCR 扩增 实验结果图： PCR电泳图（M为marker3） 实验分析如下： 我们组的实验结果条带是第15条，由上面的电泳图中可以看出，第15条目的DNA没能扩增出来，实验失败。分析一下我实验失败的原因，可能是：①在加样时的操作不规范。在加入的一些体积较小的成分时，操作不到位。另外实验中是先加100ul的体系，然后分装的两管中进行的。在这个过程中极容易出现操作问题。②模板DNA的浓度、酶的浓度太高，酶失活等问题也可能导致实验的失败。 实验五 真菌基因组DNA 的提取及电泳检测 实验结果： 香菇DNA电泳图（图中M为marker3） 实验结果分析： 从电泳图中可以看出，4号最好，浓度高且杂质少，条带亮。6号的的DNA条带出现了峰状，估计是杂质造成的。总体来说这次整个实验的条带都已出来，实验是成功的。我点了3号孔，条带不是很亮但没有峰状结构，说明杂质比较少；条带下面没有明显拖尾，说明降解不多，实验取得成功。 实验六 真菌RNA 的提取及电泳检测 实验结果： 金针菇RNA电泳图(注：图中M为marker3) 实验结果分析： 从电泳图可以看出，所有同学的RNA全都降解了。可能的原因如下： 环境的影响。我们提取RNA的时候没有在密闭不透风的环境中进行。另外实验室人多口杂，整个空间飘满了RNA的降解酶。 另外我们用的是石英砂来研磨，而且我是第一次操作这种实验，当中存在不规范的操作，也是一个很重要的影响因素。 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 M 11 12 13 14 15 16 17 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M 10 11 12 13 14 15