海洋放线菌的接种培养与观察.PDF

模块三之 实验2 放线菌的分离效果观察 放线菌的点接培养和保种 放线菌形态的观察(印片法) 主讲人:张连茹 2006年12月版 3 本次实验的流程 讲解(实验目的,原理,内容和方法) 实验操作 倒平板(每人2只)用于点接培养 放线菌菌落形态观察及结果分析讨论. 挑取上述放线菌的菌落进行点接平板, 取与点接菌落相同的菌落用划线法进行斜面保种 印片法观察放线菌的形态并绘图 实验报告 思考题 整理及清洁 Actinomycetes:major features Prokaryotic Gram positive Filamentous Asexual spores Some form associations:Actinorhizae 本次实验的目的与要求 1．学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。 2．观察放线菌的菌落特征、个体形态等。 要求 1 能区分放线菌的菌落 2 从形态特征上对放线菌进行初步分类 3 学会用印片法观察放线菌.了解用插片法和玻璃纸 法观察放线菌的方法. 实验的基本原理 根据放线菌的特征, 以不破坏放线菌的形态特征为 原则, 对放线菌进行观察.采用特定的方法. 采用的方法有:玻璃纸法,插片法,印片法来观察放 线菌的形态特征. 1.扦片法 将放线菌接种在琼脂平板上，扦上灭菌盖 玻片后培养，使放线菌丝沿着培养基表面 与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻上， 观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上 直接镜检。 该方法可以观察到放线菌自然生长状态下 的特征，而且便于观察不同生长期的形态, 尤其适于观察基丝的分裂和隔的形成。 2.玻璃纸法 玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻 璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将放线菌 接种于玻璃纸上，经培养，放线菌在玻璃 纸上生长形成菌苔。观察时，揭下玻璃 纸，固定在载玻片上直接镜检。 这种方法既能保持放线菌的自然生长，也 便于观察不同生长期的形态特征。 3.印片法 将要观察的放线菌的菌落或菌苔，先 印在载玻片上，经染色后观察，这种 方法主要用于观察气丝，孢子丝的形 态，孢子的排列及其形状等. 方法简便，但形态特征可能有所改变。 不能观察到基丝形态。 实验内容之一 对上次分离实验的结果的分析讨论: 对所分离土壤放线菌的形态进行观察,熟悉放线菌的菌落特 征。 菌落表面形态（圆形、根状、不规则状） 、菌落隆起形态（扁平、隆起、凸起、脐状凸起）、菌落边缘 形状（波状、边缘整齐、丝状、锯齿状、裂叶状）,呈干粉 状. 菌落特征主要包括以下方面: 大小 颜色 干湿 形状 高度 透明程度 边缘 是否易挑起等 放线菌的形态特征提示 在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针 在培养基上着生牢固，与基质结合紧密，难以用接种针 挑取。 挑取。 Streptomyces kanamyceticus Streptomyces avermitilis 卡那霉素链霉菌 阿福霉素链霉菌 实验内容之二 放线菌的点接培养和保种 (斜面每人4支，培养皿每人2只，载玻片每小组4片) 由平板到平板:取融化的高氏一号培养基80mL,每 组倒4个平板,每一平板点种4~5个菌落（每人2个 平板） 挑取已经点种的菌落在斜面上划线培养，保种 （每人4管）。 实验内容之三 印片观察 (1)印片 用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基切下一小块(2mm)，菌面朝 上放在一载玻片上，另取一洁净载玻片置于火焰上微热后，盖在菌苔上，轻轻按 压，使培养物（气丝、孢子丝或孢子）粘附（“ 印” ）在后一块载玻片的中央，有 印迹的一面朝上，通过火焰2~3次固定。 印片时不要用力压，