溴化乙锭（EB）净化和处理方法.PDFVIP

EB EB 溴化乙锭（EEBB）净化和处理方法 EB是我们从事生命科学尤其是分子生物学经常要接触的致癌性物质,且不好处理.现提供如下方法,供 参考. 特别是刚走进实验室未生育的新同行,一定得学会保护自己呵,否则还涉及到下一代问题 实验室中经常有EB被打翻或EB废弃物的处理问题，如何做到标准处理？ 1 严禁随便丢弃。因为EB是强致癌性，而且易挥发，挥发至空气中，危害很大。 2 废 EB溶液的处理方法 (1) 对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液，可如下处理： a. 将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml； b. 加入一倍体积的0.5mol/LKMnO4 ，混匀，再加入等量的25mol/LHCl，混匀，置室温数小时； c. 加入一倍体积的2.5mol/LNaOH，混匀并废弃。 (2)EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理： a. 按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时； b. 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。 （3） 废EB接触物，如抹布，枪头。 一般回收至黑色的玻璃瓶中，定期进行焚烧处理。 由于EB是一种诱变剂，直接倒入水槽或扔进拉圾箱可能会带来危害。所以应该根据情况处理： 1. 电泳胶 胶里面痕量的EB没有问题，如果小于0.1％可以直接扔掉。而如果发红，即大于等于0.1％时应该放 在生物危害柜中焚烧掉。 2.EB溶液 10ug/ml 时可以直接倒入水槽 10ug/ml 时应该用木炭过滤或化学方法使其失活（推荐用木炭过滤的方法） 溶液中还有重金属、氢化物、硫化物时应该按照危险垃圾处理 化学中和方法： 方法一：加等体积的漂白粉，搅拌4小时，静置4 天，用NaOH调至pH4-9, 倒入排水沟的同时用大 量水冲。 方法二：每100ml加5％磷酸，加12ml0.5M的NaNO3，搅拌并静置20小时，同上调pH, 倾倒。 3. 手套、设备等物品 放在医用垃圾中焚烧，如污染严重则用漂白剂处理。 EB的净化处理方法 小心：溴化乙锭是强诱变剂，并有中度毒性。取用含有这一燃料的溶液时务必戴上手套。这些溶液使 用后应按下面介绍的方法之一进行净化处理。 （一）溴化乙锭浓溶液（即浓度0.5mg/ml 的溴化乙锭溶液）的净化处理 方法Ⅰ： 用沙门氏菌——微粒体测定法表明。本方法可使EB的诱变活性降至原来的1/200 左右。 1）加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/ml以下： 2）在所得的溶液中加入0.2体积的新配制的5%次磷酸和0.12体积的新鲜配置的0.5mol/L亚硝酸钠， 小心混匀。切记：检测该溶液的pH值应3.0，市售次磷酸一般为50%溶液，具有腐蚀性。应小心操 作。必须在临用前现用现稀释。亚硝酸钠溶液（0.5mol/L）的配法：用水溶液34.5g亚硝酸钠并定容至 终体积500ml，现用现配。 3）于室温温育24小时后，加入大大过量的1mol/L碳酸钠。该溶液可予丢弃。 方法Ⅱ： 用沙门氏菌——微粒体测定法检查，经用本方法处理后，可使EB的诱变活性降低至原来的 1/3000左右。但也有报告称，在用净化溶液处理的空白样品中，偶尔有一些仍具有诱变活性。 1）加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/L以下； 2）加入1倍体积的0.5mol/LKMnO4，小心混合后再加入1倍体积的2.5mol/LHCl小心混匀，于室温 放置数小时； 3）加入1倍体积的2.5mol/LNaOH小心混合后可丢弃该溶液。 （二）EB稀溶液（如含有0.5ug/mlEB的电泳缓冲液）的净化处理 方法Ⅰ 1）每100ml溶液中加入2.9gAmberliteXAD-16，这是一种非离子型多聚吸附剂，可向RohmHaas 公司购置； 2）于室温放置12小时，不时摇动； 3）用 Whatman1号滤纸过滤溶液，丢弃滤液； 4）用塑料袋封装滤纸和Amberlite 树脂，作为有害废物予以丢弃； 方法Ⅱ 1）每100ml溶液中加100mg粉状活性炭； 2）于室温放置1小时，不时摇动； 3）用Whatman1 号滤纸过滤溶液，丢弃滤液； 4）用塑料袋封装滤纸和活性炭； 注：用次氯酸（漂白剂）处理EB稀释液并不可取； EB在262℃分解，在标准条件进行焚化后不可 能再有危害性； AmberliteXAD-16 或活性炭可用于净化被EB污染的物体表面