FlowCytometry教学幻灯片讲义.ppt

FCM在细胞凋亡研究中的应用 Apoptosis是细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程，最后细胞脱落离体或裂解为若干凋亡小体，被其它细胞吞噬。 Apoptosis 经历的过程为： 1)染色质浓缩前阶段。 2)染色质浓缩染色质被断裂成核小体大小的片段。 3)细胞器浓缩形成凋亡小体。 4)凋亡小体被周围细胞或巨噬细胞吞噬，然后被溶酶体分解。 Necrosis vs Apoptosis Chromatin Condensation Formation of Apoptotic bodies Cell shrinkage Energy preserved Surface blebbing Cell swelling ATP depletion No chromatin condensation Membrane lysis Leakage Inflammation Phagocytosis No inflammation 细胞形态分析 凋亡早期，细胞体积缩小，形成低FSC和高SSC；凋亡后期，染色质浓集和核碎裂，FSC和SSC均减弱。 优点：无需染色，真实反映细胞形 态和活力 缺点：参数无特异性、可变性大。 Apoptosis 细胞膜结构与功能改变分析 胞膜结构完整性的改变：PI(死细胞)、FDA(活细