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水稻稻曲病厚垣孢子和菌核休眠机制的研究(开题报告)
水稻稻曲病厚垣孢子和菌核休眠机制的研究 研究方向:微生物与植物分子互作 姓 名:燕玮婷 指导老师:刘二明 教授 填写日期:2009年1月 一、研究的目的及意义 二、研究进展 三、研究内容及预期目标 四、技术路线 五、可行性与创新之处 六、研究进程 七、经费预算 一、研究目的及意义 一般穗发病率为4%~6%,严重达50%以上,粒发病率为0.2%~0.4%,高的可达5%以上 稻曲病菌在植物病原真菌中具有很典型的代表性。目前国内外对有关厚垣孢子萌发的一些生物学方面的研究较多,主要提到了影响厚垣孢子萌发率的多种因素和如何提高其萌发率,但并未提及其内在休眠机制,此外,对菌核休眠的研究更为少见;在表面形态学方面,仅有少数文献对其形态进行了描述。 因此,开展稻曲病厚垣孢子和菌核休眠机制的研究对植物病原真菌休眠机制的揭示有普遍的理论价值。同时对稻曲病的发生期预测和针对性的创新防治技术有十分重要的实践意义。 二、研究进展 休眠是多数生物的一个重要生物学性状,无论是动植物,还是真菌都有休眠现象。植物主要表现为种子休眠,种子休眠的原因是多方面的,可分为四种类型:(1)机械休眠;(2)胚休眠;(3)激素休眠;(4)物理休眠。大多数情况下,导致种子休眠的原因极其复杂,而且其类型一般都是综合性的。 真菌的有性和无性孢子可类比为植物的种子。根据现有的研究,真菌孢子的休眠主要有两个类型: (1)内源或结构性休眠 (endogenous/ constitutive dormancy),这种休眠类型多为各种有性孢子,如卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子,以及无性的厚垣孢子和冬孢子。 (2)外源或诱导性休眠(Endogenous/ induced dormancy),这多为无性类型孢子,如分生孢子。 此外,抑菌作用(Fungistasia/mycostasis)对孢子和菌核的休眠也有影响,这种现象是与外源休眠相联系的。 稻曲病菌厚垣孢子在发育过程中,有两种常见的颜色,研究表明黄色的厚垣孢子形成后即可萌发(毋需经过休眠),但会随着贮存时间的延长,萌发率逐渐下降;而黑色厚垣孢子需要经过长时间越冬后才能萌发。此外,田间条件、温度、PH值等均对其萌发有一定的影响。 在该病菌的形态学的观察方面,张君成等对子座、厚垣孢子、分生孢子的形态进行了研究。 右图为厚垣孢子切面(8000x) 三、研究内容及预期目标 3.1 研究内容 3.2 预期目标 3.2.1 明确表面形态和超微结构的差异,期望揭示其结构性(物理)休眠机制; 3.2.2 探明主要化学成分含量的变化。通过比较,以揭示病菌内源性休眠机制; 3.2.3 初步确定不同来源的病菌经越冬休眠后其周际生境中的主要微生物类群。 四、技术路线 4.1 表面形态学观察 4.1.1 扫描电子显微镜(SEM) 将田间采集的黄色、墨绿色厚垣孢子经固定、镀金处理后进行扫描电镜观察。 4.1.2 透射电子显微镜(TEM) 4.2 成分分析 4.3 萌发试验 田间采集的不同颜色厚垣孢子经无菌水冲洗3次后,放入盛有无菌水的锥形瓶中,26℃光照培养;每隔4h镜检,照相,并计算萌发率。 将采集的样品每隔5d做一次重复试验,直至黄色厚垣孢子萌发率低于2%。 4.4 微生物区系分析 五、可行性与创新之处 5.1 可行性 常规部分的试验手段,葡聚糖、蛋白质和黑色素测定的实验手段完备;SEM和TEM的实验条件和手段分析测试中心拥有。 5.2 创新之处 采用多项对比法分析厚垣孢子和菌核休眠体机制;首次将各种成分的含量和稻曲病菌的休眠机制联系起来。 六、研究进程 2008年10月-2009年1月 查阅文献,采样,实验方案的制作,完成扫描电镜和透射电镜的观察分析,开题; 2009年
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