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原核表达的基因同源诱导番木瓜抗性的研究精品
园 艺 学 报 2013 ，40 （7 ）：1269 –1277 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
原核表达的 PRSV HC-Pro 基因同源 dsRNA 诱
导番木瓜抗性的研究
1,3 2 2 2 1,2,*
杨国峰 ，沈文涛 ，言 普 ，黎小瑛 ，周 鹏
1 2 3
（海南大学农学院，海口 570228 ； 中国热带农业科学院热带生物技术研究所，分析测试中心，海口 571101 ； 海
南师范大学生命科学学院，海口 571158 ）
摘 要：利用番木瓜环斑病毒（PRSV ）HC-Pro 基因 3′端 824 bp 区段，通过 OZ-LIC 法构建了含有
PDK 内含子的发夹RNA 编码结构，并选用 pSP73 和 M-Jm109LacY 分别作为宿主载体和宿主菌，构建了
高效的同源 dsRNA 原核表达工程菌 M-Jm109LacY/pSP73-RNAi-H824 ，经 IPTG 诱导表达的 dsRNA 不被
DNase I 和 RNase A 降解，稳定性较好。采用喷洒 dsRNA 粗制品的方式对番木瓜植株进行保护性处理和
治疗性处理，症状观察及 ELISA 、Real-time RT-PCR 分析结果表明，保护性处理能有效诱发对番木瓜环斑
病毒的抗性（发病率低，发病时间晚）；治疗性处理（植株已接种PRSV 25 d ）能在处理初期引起番木瓜
环斑病毒积累量发生短暂降低。
关键词：番木瓜环斑病毒；HC-Pro ；dsRNA ；原核表达；RNA 沉默
中图分类号：S 667.9 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2013 ）07-1269-09
Studies of Bacterially Expressed dsRNAs Targeting PRSV HC-Pro Gene
Inducing Resistance to PRSV
1,3 2 2 2 1,2,*
YANG Guo-feng ，SHEN Wen-tao ，YAN Pu ，LI Xiao-ying ，and ZHOU Peng
1 2
（College of Agriculture，Hainan University ，Haikou 570228，China；Institute of Biotechnology and Bioscience ，Analysis
3
and Testing Center ，Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences，Haikou 571101，China；College of Life Sciences，
Hainan Normal University ，Haikou 571158，China ）
Abstract ：A Hairpin RNA coding structure of the 824 bp region （from 2 274 to 3 097
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