利用BiacoreA100对杂交瘤的早期动力学筛选可实现充满-生物通.PDFVIP

GE Healthcare 应用指南84 Biacore 系统 利用Biacore A100对杂交瘤的早 期动力学筛选可实现充满信心的 抗体选择 • 直接从杂交瘤样品中进行单克隆抗体（mAb ）的快速动 力学筛选 − ≈ 800 个杂交瘤/天的高效筛选速率 − 高效的单克隆抗体筛选，有着理想的动力学特征 • 选定单克隆抗体的高分辨率动力学鉴定 − 直接在粗制样品中测定的亲和力和动力学参数 − 专门的评估软件在数分钟内处理动力学数据 − 候选物的选择基于与治疗相关的结合特性 − 在不同缓冲液条件下的平行分析，以鉴定抗体性能的 稳定性 • 与ELISA 等终点分析相比，可在工艺开发早期更充满信心 地选择单克隆抗体 图1. Biacore A100 在一个多功能、高性能的系统中，为直接来自粗制杂交 瘤样品的单克隆抗体提供了快速的动力学筛选和高分辨率的动力学鉴定。 简介 “Biacore A100 可在准确测定结合动力学和亲和力上实现大幅度的通 量增加，以协助在开发过程中更早作出导向选择。” 单克隆抗体（mAb ）代表了一类重要的蛋白，它们对整个 Scott L. Klakamp 博士，美国Abgenix 公司的资深科学家 生物医学领域产生了深刻的影响。它们可作为了解疾病过 程中必不可少的研究工具，或作为精确诊断试剂，并且越 来越多地作为多种疾病的生物治疗药物。如今，技术的进 致谢 步实现了针对特定生物体目标的大量抗体的生产，使筛选 我们很感谢Scott Klakamp Andy Drake （Abgenix 公司） 方法成为日益增长的需求，这些方法能为自信的候选物筛 及 David Myszka （犹他州大学）的宝贵贡献，让此次合 选提供所需的高质量结合数据。 作变得可行。 与 ELISA 等标准的需要标记的终点筛选方法相比，无标记 相互作用分析的Biacore™ 系统可实现抗体性能的分析，促 进了基于功能上相关的动力学性质的筛选。 通过”Epitope Focused Selection”技术 产生改造的人Fab 适当的分析形式能够直接在粗提的杂交瘤样品中进行快 利用XenoMouse® 技术生产人单克隆抗体 速的分析，而抗原消耗量相对较低，大约是一般 ELISA 的50%。Biacore A100 每天能够进行大约800 个杂交瘤 本研究所用的抗体是来自 Abgenix 公司，他们利用 样品的动力学筛选，其中每个循环中可同时分析8 个单 XenoMouse 技术实现了完全人源化的 IgGk 和 IgG1 抗体 克隆抗体。那些显示出理想的结合特征的精选样品随后 在小鼠中的生产，这些抗体是转基因的，带有人 IgG 位 根据定量亲和力和动力学速率常数数据开展全面的动力 点。“人源化”抗体的传统方法是将小鼠单克隆抗体的互补 学鉴定。这个信息是基于单克隆抗体-抗原相互作用的彻