机能设计实验.doc

实验设计大纲 实验名称：大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的研究 课题来源：自 选 设计班级：2008级临床本科麻醉班 设计人员： 设计日期：2010年4月13日 指导老师： 成都医学院实验技术教研室 2010年制 一、实验设计的目的意义： 目的与意义: 本实验建立一种新型的心肌急性缺血再灌注损伤模型，以深入探讨一种更符合临床实际需求的实验方法。本模型通过结扎主动脉根部引起心肌缺血5min再灌注30min建立心肌急性缺血再灌注模型，通过应用透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变，同时检测心肌组织匀浆丙二醛(Maleie Dialdehyde，MDA)含量、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)活力。对该试验进行全面客观的评价。 国内外研究现状：外科手术是先天性心脏畸形和后天性心脏瓣膜疾病的主要治疗方式，缺血再灌注损伤是影响其手术效果的主要原因之一。心肌缺血再灌注损伤的基础研究目前仍主要集中在实验动物身上进行。大鼠因其冠状动脉侧支循环少、心肌梗死出现早、心律失常发生率高、重复性和稳定性好、价格低廉成为复制缺血性心肌疾病首选实验动物。体外循环下心肌缺血再灌注损伤模型的复制鲜见报道。Langendorff离体大鼠心脏灌注模型已不能满足外科手术研究要求，本研究为建立一种新型的在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型提供了新思路。 存在的问题：心肌缺血再灌注损伤模型的研究方法目前主要有2种：使用人工呼吸的心脏原位结扎、提线法。因大鼠冠状动脉小且脆性大，即使是5—0无损伤线也极易使冠状动脉切断，再灌注时剪断结扎线困难，可操作性差，且丝线结扎动脉时易损伤其内膜，影响再灌注血流。 解决问题的思路：本研究以开胸后左手轻轻提起大鼠心脏，右手执动脉夹结扎主动脉根部造成心肌完全缺血，再灌注时只需松开动脉夹，方法简单，可操作性强，一人即可完成，避免了在心脏跳动下穿针结扎冠状动脉的困难、损伤心肌、丝线切断冠状动脉等；再灌注时减少了因结扎线不易剪断等情况发生。结扎冠状动脉前降支造成心肌缺血再灌注损伤的心肌范围有限，加之大鼠心脏本身就小，很大程度上限制了实验研究的指标测定，本实验引起整个心肌缺血，取材范围广泛，丰富了实验研究指标的测定，更符合实验研究需求。 参考文献： [1] Pinelli A, Trivulzio S, Brenna S, Pretreatment with tetrandrine has protective effects against isoproterenol-induced myocardial infarction in rabbits，In Vivo，2010，24(3):265-70[2] Chobanian AV，Bakris GL，Black HR，et a1．Seventh report of the joint national committee on prevention，detection，evaluation，and treatment of high blood pressure[J]． Hypertension，2003，42 (6)：1206—1252[3] Suman V，Saktipada Mookheee M．Perspectives on isolated systolic hypertension in elderly patients[J]． Arch Fam Med，2000，9： 319—323[4]申强，邓平，美托洛尔对高血压病患者围手术期心肌缺血的预防，心血管康复医学杂志，2009，8（18）：401—402 [4]陈业农，周逸半，汪克明，等．2008．急性心肌缺血冉灌注损伤大鼠模型制备方法的改进与评估． 中国中医急症，17(3)：359～363 [5]刘艳伟，刘水平，成建定，等．2007 大鼠HJL缺血再灌注模型的改进及心电图判断指标[J]．实用儿科临床杂志，22(7)：525～527 [6]张新定，吕琪，张永亮，等．2008．大鼠心肌缺血再灌注模 建立方法之改进[J]．武警医学院学报，17(11)：941～943 [7]Schneider R ，W.ehK，Aust W，eta1．2009．Cardiac ischemia and reperfusion in spontaneously diabetic rats with without application of EGb 761：II． Interstitium and microvasculature f J]． Histol His—topathol，24(5)：587～598 二、实验设计方案 （一）实验设计目标，拟解决的关键问题 设计目标：本模型采用