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大肠杆菌pts系统改造及重组菌生长性能测定
生 物 工 程 学 报 肖梦榕 等/大肠杆菌PTS 系统改造及重组菌生长性能测定 1561
Chinese Journal of Biotechnology
/cjbcn October 25, 2014, 30(10): 1561−1572
DOI: 10.13345/j.cjb.130656 ©2014 Chin J Biotech, All rights reserved
工业生物技术
PTS
肖梦榕,张梁,刘双平,石贵阳
214122
, , . PTS . , 2014, 30(10): 1561–1572.
Xiao MR, Zhang L, Liu SP, et al. Transformation of phosphotransferase system in Escherichia coli . Chin J Biotech, 2014,
30(10): 1561–1572.
摘 要 : 利用 Red 重组系统对野生大肠杆菌 Escherichia coli 磷酸烯醇式丙酮酸−糖磷酸转移酶系统
(Phosphoenolpyruvate: carbohydrate phosphotransferase system, PTS) 进行修饰改造,敲除 PTS 系统中关
键组分 E ⅡCBGlc 的编码基因 (ptsG ) ,磷酸组氨酸搬运蛋白HPr 的编码基因 (ptsI ) ,同时敲入来源于运动
发酵单胞菌 Zymomonas mobilis 的葡萄糖易化体 (Glucose facilitator) 编码基因 (glf ) ,构建重组大肠杆
菌,比较测定并系统评价了基因敲除和敲入对细胞的生长、葡萄糖代谢和乙酸积累的影响。敲除基因ptsG
和ptsI 造成大肠杆菌 PTS 系统部分功能缺失,细胞生长受到一定限制,敲入glf 基因后,重组大肠杆菌
能够利用Glf-Glk ( 葡萄糖易化体- 葡萄糖激酶) 途径,消耗 ATP 将葡萄糖进行磷酸化并转运进入细胞。
通过该途径转运葡萄糖能够提高葡萄糖利用效率,降低副产物乙酸生成,同时能够使更多的碳代谢流进
入后续相关合成途径,预期能够提高相关产物产量。
: 大肠杆菌,运动发酵单胞菌,PTS 系统,glf ,Red 同源重组,代谢工程,发酵
Received: December 23, 2013; Accepted: February 10, 2014
Supported by: National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) (No. 2012AA021201), the
Program for New Century Excellent Talents in University (No. NCET-11-0665), Innovative Research Team of Jiangsu Province, the
Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions (No. PADP), the Innovative Program for Graduate
Student of Jiangsu Province (No. CXLX12_0733), the Fundamental Research Funds for the Central Universities (No. JUDCF12016).
Corresponding author: Guiyang Sh
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