动物微生物学实验3.ppt

实验三 培养基的制备 一目的要求 1.掌握一般培养基制备的原则和要求。 2.熟悉一般培养基制备的过程。 二.原理 牛肉膏蛋白胨培养基是培养腐生性细菌的常规培养基，也是微生物实验室中常备培养基，为天然培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐，蛋白胨主要提供氮源、NaCl提供无机盐。 牛肉膏 5.0g 食盐 5.0g pH 7.2-7.4 蛋白胨10.0g 自来水1000mL (加入1.5%-1.8%琼脂即成固体培养基) 三 仪器材料 微波炉、高压灭菌器、玻璃器皿、PH试纸、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、氢氧化钠。 四 操作步骤 一)、培养基的制备原则和要求 1.药品纯净 , 称量准确。 2.所用器皿须洁净 3.准确测定调节pH值. 4.过滤培养基 5.严格控制灭菌时间和温度. 二)、培养基制备过程及方法 称量--加热溶化--过滤--PH滴定--分装--灭菌 1)肉浸液肉汤（普通肉汤）的制法 蛋白胨 10g，氯化钠 5g，磷酸氢二钾 2g。 牛肉粉或牛肉膏3g,水1000ml .PH7.4—7.6 121.3度15磅高压15钟. 2)营养琼脂培养基（普通琼脂）的制法 普通肉汤 1000ml 琼脂粉15g PH7.4—7.6 121.3度15磅高压15钟. 3)半固体培养基的制法 4）鲜血琼脂的制法 PH的滴定: 1.酸度计法 2.PH比色计法: 五 注意事项 1.称量准确 2.加热搅拌 3.补足水分 4.容器适合 5.高压彻底 6.空白培养