犬小孢子菌（羊毛状小孢子菌）.doc

犬小孢子菌（羊毛状小孢子菌） 1检验目的：从病损中分离犬小孢子菌。 2标本来源：皮屑、甲屑、毛发等。 3标本收集和制备： 皮屑：⑴检查前一周，皮损部位不应使用抗真菌药物。取材前局部用70%酒精彻底消毒，不能使用酒精的部位可用无菌蒸馏水清洗数次。 ⑵接种刀火焰消毒冷却后，轻轻刮取皮屑，滴一滴5%~10%KOH直接检查。 ⑶由于癣具活动的边缘从最新的皮损处采取，皮损为水疱，应取疱壁检查而将疱液弃去。若为脓疱，应取脓液。 甲屑：病甲局部用70%酒精消毒，刮取正常甲与病甲交界处并且贴近甲床部的甲屑。 毛发：毛发检查应采取病发，病发表现为毛干上有结节或菌韒或毛发枯黄无光泽，脆易折断或松动易拨除。用棉球擦拭患处头皮取断发。直接检查取3~5根病发标本，加10%~20%KOH，火焰上快速通过数次，易不沸为度。 4检测步骤：⑴直接镜检：取皮屑、甲屑或3-5根病发加10% KOH ，加盖盖玻片，然后置镜下检查。 ⑵培养检查：取皮屑、甲屑或病发标本5~10根75%酒精消毒后接种于沙氏培养基，25℃培养2周。 5结果判断： 直接镜检：可见孢子在毛干外，发内可有菌丝。皮屑中可见菌丝和孢子。 培养检查： ⑴菌落特征 快速生长，质地毛状到羊毛状，成熟菌落呈棉絮状外观。表面颜色白到黄色，背面黄到黄桔色，有时苍白色。转种后，容易发生绒毛状变异。 ⑵显微镜特征 小分生孢子棒形，不常见。大分生孢子数量多，梭形、纺锤形，在顶点稍微弯曲，壁厚和棘状突起，有6~12个分隔，末端有帽状肥大，可见球拍菌丝、破梳状菌丝。 生理学实验： （1）在米饭培养基上培养生长良好，白色菌丝，黄色色素，可促进大小分生孢子的形成； （2）毛发穿孔试验（+）； （3）PDA培养基上产生黄色色素。 鉴别要点： （1）特征性厚壁、顶端肥大微弯曲如帽样的大分生孢子；（2）菌落黄色色素；（3）发外形孢子感染；（4）配对实验 6临床意义：直接镜检阳性说明有真菌感染，但阴性不能除外诊断。 培养的意义：从临床标本中分离犬小孢子菌，已确定是否有真菌感染。