[理学]第四章 DNA复制6.ppt

第四章 DNA复制——遗传信息的传递与保持 遗传信息的传递——中心法则 （1）DNA解链酶（helicase） 是通过水解ATP获得能量来解开双链DNA的一类酶的总称。其中有的参与DNA的复制，有的参与DNA的重组、修复等非复制过程。 （2）单链结合蛋白（single-strand binding protein, SSB) 诸如真核生物中的复制因子A（RF-A)这类蛋白质，与DNA单链相结合，既防止核酸酶的水解又避免DNA单链重新构成双链，还可使其前端的双螺旋的稳定性降低，易于双链的解开。原核生物SSB结合表现为协同效应，如第一个SSB结合能力为1，则第二个结合力可高达103 ，而真核生物的SSB无此效应。 （3）拓扑异构酶（topoisomerase） 前已述及，其中I型的有大肠杆菌的拓扑异构酶I、III,真核生物的DNA拓扑异构酶I；II型的有大肠杆菌的拓扑异构酶IV、噬菌体（T4)、真核生物的DNA拓扑异构酶II. Sanger的酶学测序原理就是根据DNA复制提前终止来确定的 3.核基质 核骨架（nuclei scaffold）是由不溶性蛋白质纤维构成的，用于DNA复制、转录等核加工过程的组织框架。是复制的工厂。 组织进核骨架中的复制叉 第二节 遗传信息的保持 遗传信息（DNA）在受外界理化因素的影响（紫外线或射线照射，化学诱变剂）或在复制过程中，都有可能发生碱基的改变，从而造成突变（沉默突变，无义突变，错义突变）。但在自然界中这种突变的发生率是较低的，主要是由于生物体具有一系列的反应机制来修复受损的DNA。 核苷酸切除修复 ①同源重组 ②位点特异性重组 ③转座重组 以E.coli的同源重组为例，了解同源重组机制的Holliday模型。 主要包括4个步骤： ①两个同源染色体DNA排列整齐 ②一个DNA的一条链断裂，并与另一个DNA对应的链连接，形成Holliday中间体 ③通过分支移动产生异源双链DNA ④Holliday中间体切开并修复，形成两个双链重组体DNA，分别为：片段重组体（patch recombinant）、拼接重组体（splice recombinant）。 ②位点特异性重组 位点特异性重组发生在特殊序列对之间，这一重组型式最早是在λ噬菌体的遗传学研究中发现的。 λ噬菌体有两种存在型式：裂解状态和溶源状态。两种类型间的转换是通过位点特异性重组实现的。 1、下列序列中的哪一个可能是mRNA： 5`--AUAGGCGAU—3`的对应基因序列 （ 　） A. 3`-UAUCCGCUA-5` B. 5`-ATCGCCTAT-3` C. 5`-TATCCGCTA-3` D. 3`-TATCCGCTA-5` 2、DNA连接酶催化的化学反应 　（ 　） A、可以填补引物遗留下的空隙 B、生成氢键 C、向3`-OH末端加入dNTP D、生成磷酸二酯键 3、Klenow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了下列哪种活性？ A.5`－3`外切酶 B.3`－5`外切酶 C.5`－3`合成酶 D. 3`－5`合成酶 4、突变 　 　 （ 　） A. 是有害因素引起有害的结果 B. 是进化的基础 C. 自然突变频率很低，可以忽略 D. 一定会引起功能受损 F.转座机制 转座分保守转座（非复制转座、简单转座、切割粘贴机制）和复制转座（非保守转座、复合转座） 保守转座：从一个位点切下转座子而在另一位点整合。 复制转座：转座子转座过程发生复制，一份留在供体位点，另一份整合至靶位点。 返座机制 逆转录病毒转座和 反转录转座子转座 转座子是一类自私DNA, 成功的转座子经常发生转移, 并尽可能地增加它的拷贝数, 但不受控制的转座会破坏宿主基因组, 并最终影响到转座子本身. 所以大多数转座子在（1）转座频率（2）靶位点的选择和特定的细胞周期等方面进行调控。因此，转座总能在无限的扩展能力以及避免给宿主带来致命的损伤之间找到一个平衡点。 G. 转座调节 反义核酸的抑制 · 甲基化作用 阻遏蛋白 · 顺式作用 细胞周期 转座调控的方式： 反义核酸的抑制 Pout Pin Tn10R 转座调节 Pout的活性比Pin强得多，并且两者间有一40bp的重迭，前者所产生的大量反向RNA能有效的抑制后者所产生的mRNA的翻译。 甲基化作用 宿主的甲基化缺陷使Tn10转座酶容易起始转录，同时有利于转座酶与IS10R的结合，有利于转座。 转座调节 阻遏蛋白调节 Ochre