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qRT-PCR技术/相关产品选购指南 qRT-PCR 逆转录定量PCR（qRT-PCR），是一种应用广泛的研究基因表达模式的方法，尤其是在样品量少或者说非常珍贵的时候。这种方法主要的优点是范围宽、敏感性高、精确度高，无PCR后处理步骤，避免了交叉污染，且产出率高，可以进行多重检测等。 技术方法简介 所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行，PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线。 RT-qPCR实验步骤 反转录:依赖反转录酶将RNA反转录成cDNDA; 扩增:用PCR的方法扩增cDNA; 检测:实时检测和定量扩增的产物. RT-qRCR影响分析可靠性关键点: 分析结果依赖于模板的数量、质量以及合理的检测方法设计; 反转录反应的非标准化影响试验的稳定性; 数据分析应该高度客观，如果不合理的分析，从分析结果中会得到混淆的错误结果; 因此通过对RT-qPCR的每一组分进行质量评价以达到最小化变异性，最大化可重复性，而且还需要沿用一个通用的数据分析的指南。对基因表达分析的标准化的需要是与人