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第六章 同核核磁实验方法 通常所谓同核核磁谱指的是1H同核谱，因为一般有机物富含氢，而1H的天然丰度达99.98%，而且1H的旋磁比最大，因而核磁信号最强。其他核的核磁信号的检测相对来讲都比较困难，尤其是蛋白质中有意义的如13C，15N的天然丰度分别只有1.11%和0.36%,相对1H的检测灵敏度只有0.0159和0.00104，因此要检测蛋白质中的13C及15N一定要有同位素标记才行，而且还需长时间累加。 一般同核谱可研究的蛋白质分子量的上限在1万左右，当然还要求蛋白质在溶液中有足够的溶解度，化学位移的分布比较分散。蛋白质中质子的化学位移基本上是random coil的化学位移加上不同构象的影响。如(折叠多的蛋白质同(螺旋多的蛋白质相比，化学位移更为分散，谱峰也更容易解析；同种氨基酸残基多的蛋白质，即使分子量较小，由于化学位移可能会比较密集，谱峰解析可能比稍大一些的蛋白质还要困难。 已经发表的脉冲序列有上百，但通常可以看作常规实验的为数不多。 6.1 一维氢谱 在记录二维谱或三维谱等之前均需要记录一维氢谱，通常蛋白质溶于水或适当的缓冲液，加5-10%的D2O作为锁场介质。一维氢谱可用于检查样品是否有足够浓度，通常16－32次采样要能得到足够信噪比的谱图，甲基由于快速旋转呈现窄峰，而酰胺质子由于化学交换及14N的标量弛豫呈现宽峰； 一维氢谱还可用于检查样品的共振峰宽是否合