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NSCLC EGFR基因突变检测 原理 操作流程 探针的设计 结果的分析 特点 临床意义 EGFR的功能 酪氨酸磷酸化是EGFR 介导的信号转导的关键分子事件。 研究表明, 通过选择性的酶抑制剂可阻断酪氨酸激酶活化, 从而抑制EGFR 激活。 因此, EGFR 酪氨酸激酶成为肿瘤治疗的重要靶分子。 近年来,以表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor, EGFR) 为治疗靶标的分子靶向治疗受到了国内外肿瘤界的普遍关注,其中EGFR酪氨酸激酶抑制剂Iressa(Genfitinib)已被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗晚期NSCLC,并且Iressa还分别获得包括日本、澳大利亚等27个国家的批准,我国也于2005年2月批准了Iressa进入临床。 EGFR突变类型 检测方法 EGFR基因扩增 FISH EGFR基因突变 荧光定量PCR 测序法 EGFR基因拷贝数增加/扩增 美国科罗拉多大学癌症中心的Hirsch 等进行了该研究,目的在于找出能够预测药物敏感性的最佳标志物。该研究发现,EGFR 基因拷贝数和吉非替尼治疗患者的生存期延长有关。 FISH 是一门新兴的分子细胞遗传学技术,广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究等许多领域。 FISH (Fluorescence in situ hybridization) 是依靠核酸探针杂交原理,利用荧光物质在核中或染色体中显示DNA序列位置的方法。 EGFR阳性扩增图--石蜡切片 EGFR阳性扩增图---胸水细胞 FISH技术的特点: 1.操作简单、 检测快速、结果易于观察。 2.重复性好、空间定位精确。 3.有效的灵敏性和特异性。 临床意义 大约1/3的患者FISH 检测为阳性,检测EGFR基因是否扩增可以有效指导吉非替尼(易瑞沙)的使用 在阳性组患者中, 应用gefitinib 的有效率为35 ﹪ , 疾病控制率高达70％。 荧光定量技术检测Exon19突变 阳性对照 样本
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