05-4三萜皂苷类成分分析.ppt

二、结构特征和理化性质 分析方法特点 1. 苷类成分复杂，干扰多 2. 多无共轭体系，无明显UV特征 3. 在硫酸作用下，可发生脱水、脱羧、氧 化等变化，产生颜色，可用于鉴别和含 含量测定 4. 以TLC、HPLC检测为主 三、定性鉴别 （一）泡沫反应 （二）比色法 （三）薄层色谱法 方法 薄层色谱-比色法 薄层扫描法（TLCS） （四）HPLC法 * 药物有UV吸收 四、含量测定 （一）重量法 * 待测组分的含量 * 正丁醇浸出物 例 甘草浸膏（甘草酸） Ch.P（2000） 【含量测定】取本品约6g，精密称定，加水50 ml溶解后，移至100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，混匀，静置12小时，精密吸取上清液25ml置烧杯中，加氨试液3滴，置水浴上蒸发至稠膏状，加水30ml使溶解，缓缓加入盐酸溶液（3→10）5 ml，在冰水中静置约30分钟，滤过，沉淀用冰水洗涤4次，每次5ml，弃去洗液及滤液， 沉淀置滤纸上放置约2~3小时，使水分自然挥散, 再用预先加热至60~70℃的乙醇10ml使沉淀溶解, 滤过，滤器用热乙醇洗涤至洗液无色，合并乙醇液，置已干燥至恒重的烧杯中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥3小时，精密称定，计算供试品中甘草酸的含量，即得。 显色剂 多为氧化剂或强酸试剂 香草醛-硫酸 香草醛-高氯酸 醋酐-硫酸 高氯酸 硫酸（或硫酸-醇液） 亚甲蓝 例 薯蓣皂苷元与硫酸-甲醇（4:1）反应后可在 405nm波长处测定 例 甘草酸与亚甲蓝反应后可在640nm波长处测 测定 例 复方扶芳藤合剂 Ch.P.（2010） 提取 水饱和的正丁醇 纯化 D101型大孔吸附树脂柱 对照品 黄芪甲苷（外标两点法） 薄层板 硅胶G（含0.1%CMC-Na） 展开剂 [正丁醇-乙酸乙酯-水(4:1:5)上层] -甲醇（10:1） 显色剂 10%硫酸乙醇溶液（100℃加热） 测定波长 λS=530nm λR=700nm 紫外检测器 柴胡皂苷元A 甘草次酸 * 第四节 三萜皂苷类成分分析 一、概述 三萜 含30个碳原子的萜类化合物 三萜苷类 三萜苷元与糖结合成苷 因其水溶液振摇能产生肥皂样泡沫，故称为三萜皂苷 （由6个异戊二烯构成） 人参 大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津， 安神 三七 散瘀止血，消肿止痛 甘草 补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急 止痛，调和诸药 麦冬 养阴生津，润肺清心 远志 安神益智，祛痰，消肿 桔梗 喧肺，利咽，祛痰，排脓 黄芪 补气固表，利尿托毒，排脓，敛疮收肌 （一）结构特征 三萜皂苷元 + 糖 三萜皂苷 多为四环三萜 以及五环三萜 葡萄糖 半乳糖 鼠李糖 阿拉伯糖 木糖 人参皂苷Re 四环三萜 中性 多无共轭体系 人参皂苷Rg1 黄芪甲苷 五环三萜 甘草酸 或酸性，或共轭 齐墩果酸 熊果酸 柴胡皂苷元A 柴胡皂苷F （二）理化性质 可降低水溶液表面张力 振摇产生肥皂样持久性泡沫 1. 物理性质 多数能与胆甾醇结合生成复合物沉淀而产生溶血作用 2. 溶解性 三萜皂苷元 + 糖 三萜皂苷 难溶于水 易溶于有机溶剂 可溶于水 易溶于含水正丁醇 难溶于极性小的溶剂 3. 显色反应 （1）醋酐-硫酸反应 （Liebermann-Burchard反应） 例 地奥心血康胶囊 Ch.P（2005） 【鉴别】（2）取本品1粒，倾出内容物，加硫酸40%乙醇溶液（取60ml硫酸，缓缓注入适量的40%乙醇溶液中，放冷，加40%乙醇溶液至1000 ml，摇匀）15ml，加热回流30分钟，加水30ml，摇匀，滤过，取沉淀少许，置点滴盘中，加醋酐3~4滴使溶解，加硫酸1～2滴，即显紫红色，渐变为棕红色至污绿色。 （3）三氯醋酸反应（Rosen-Heimer反应） （2）五氯化锑反应（Kahlenbe