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- 2018-03-01 发布于浙江
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第四节 酶的固定化
一、固定化酶
1.含义
通过物理或化学的方法,将水溶性的酶与不溶性的载体结合,使酶固定在载体上,并在一定的空间范围内进行催化反应。
2.方法
(1)共价键结合法:通过化学反应将酶以共价键结合到尼龙等载体上。
(2)包埋法:将酶包埋到多孔性凝胶中的固定化方法。
(3)物理吸附法。
3.优点
(1)固定化酶的活性稳定,可反复使用;
(2)固定化酶能与反应液分开,制品较易纯化;
(3)工业化生产可实现大批量、连续化、自动化;
(4)极大地降低了生产成本。
4.缺点
需要制备纯净的酶,稍有不慎,酶就会失活。
二、固定化细胞
1.含义
用适当的载体将合成酶的细胞固定起来。
2.优点
比固定化酶更简捷,使用寿命更长。
三、木瓜蛋白酶的固定化操作技术
取尼龙布浸入等体积的CaCl2溶液和甲醇溶液中10 s左右―→盐酸溶液中室温下水解45 min―→蒸馏水冲洗至中性―→室温下放入戊二醛溶液中浸泡20 min―→磷酸缓冲液(pH为7.8)反复洗涤―→木瓜蛋白酶溶液中固定3.5 h,温度为4_℃―→用NaCl溶液洗去多余的蛋白酶。
预习完成后,请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中问题1 问题2 问题3 问题4
一、酶、固定化酶与固定化细胞的比较
直接使用酶 固定化酶 固定化细胞 缺点 ①对环境条件非常敏感,易失活
②难回收,成本高,影响产品质量 不利于催
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