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在医学检验、药物分析、生物化学、毒性分析中的应用 荧光探针法测定蛋白质 原理： Mn+ 与含有－OH或C＝O的有机染料(发荧光的分子)相遇时，氧原子中的弧对电子可顺利地进入杂化轨道，形成稳定的配合物。在酸性条件下，该体系遇到结构不对称的蛋白质分子时，互相极化产生静电作用而生成新的大分子，改变了原体系的光谱性能，从而能定量测定蛋白质的含量。 为增大染料和蛋白质的溶解度，常加入表面活性剂。 如Ti(iv)-4,5-二溴苯基荧光酮-Tween-80与蛋白质的显色反应可测定尿中蛋白，尿液中其它成分不干扰。 * * 主要内容 荧光的产生 荧光效率与化学结构的关系 荧光光度法的定量依据 荧光光度计 应用 第3章 分子荧光分析法 §1 荧光的产生 荧 光: 以辐射驰豫的形式回到基态时的发射光 在分子荧光分析中，常以紫外光及可见光区的辐射作为激发能，所产生的荧光则多在可见光区 问题： 分子荧光光谱是连续光谱吗? （二）激发光谱曲线和荧光光谱曲线 荧光为光致发光，因此必须选择合适的激发光波长，可根据它们的激发光谱曲线来确定。 固定测量波长为荧光最大发射波长，然后改变激发波长，根据所测得的荧光（磷光）强度与激发光波长的关系，即可绘制 激发光谱曲线 激发光谱曲线与其吸收曲线可能相同，但激发光谱曲线是荧光强度与波长的关系曲线，吸收曲线