第9章吸光光度法-2.ppt

第9章 吸光光度法 电磁辐射按波长顺序排列： γ射线→ X 射线→紫外光→可见光→红外光→微波→无线电波 方便、灵敏，准确度差。常用于限界分析。 分光光度计的主要部件 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同 检测器 光电管 6. 双波长分光光度法消除干扰(不要求) 双波长分光光度法消除浑浊背景干扰 常药降压片中氢氯噻嗪含量的测定 1.氢氯噻嗪. 2.硫酸双肼肽嗪 3. 盐酸可乐定 4.常药降压片 肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取 方法：肝匀浆用乙腈浸提，浸提液用6％的HClO4稀释，然后用GDX100大孔树脂萃取，用二氯甲烷5mL洗脱杀鼠剂，40℃挥干，剩余物用0.1mol·L-1NaOH4mL溶解后，紫外导数光谱测定。 250 290 330 ? 4 1 2 3 1 2 A ⅴ 显色反应的条件要易于控制 9-3 显色反应及显色条件的选择 ⅲ 对比度要大，显色剂与有色化合物(??max)最大吸收波长相差60nm以上。 ⅳ MR组成恒定，化学性质稳定。 例如测Cu2+时：氨水+Cu2+配合物，ε=1.2×102L?mol-1?cm-1； 苦胺R(0.7M HCl) +Cu2+ ， ε=2.8×104L?mol-1?cm-1； 双硫腙(0.1 M)，以CCl4萃取， ε=5.0×104L?mol-1?cm-1 ： ： ： ： －NH2，－OH，－X （孤对电子）ne O －N＝N－，－N＝O， O C=S,－N （共轭双键）πe 无机显色剂: SCN- [Fe(SCN)]2+（Fe3+、Mo(VI)、W(V)、Nb5+）；钼酸铵（P、Si、W）；H2O2 （V5+、Ti4+） 有机显色剂（有机显色剂及其产物的颜色与分子结构有关）： 9-3 显色反应及显色条件的选择 显色剂 生色团：是某些含不饱和键的基团，如偶氮基、对醌基 和羰基等。这些基团中的π电子被激发时需能量较小，可吸收波长200 nm以上的可见光而显色。 助色团：是含孤对电子的基团，如氨基、羟基和卤代基等。这些基团与生色团上的不饱和键作用，使颜色加深。 CH3－C－C－CH3 HO－N N－OH ＝ ＝ N N OH COOH SO 3 H OO型： N N N O H OH ON型： PAR N H N H N S N S型： 双硫腙 NN型： 丁二酮肟 邻二氮菲 磺基水杨酸 有机显色剂 9-3 显色反应及显色条件的选择 9-3 显色反应及显色条件的选择 2. 显色条件的选择 1）显色剂用量（c(M)、pH一定） 显色反应：M(待测物) + R(显色剂) = MR(有色配合物) 为使显色反应进行完全，需加入过量的显色剂。但显色剂不是越多越好。有些显色反应，显色剂加入太多，反而会引起副反应，对测定不利。在实际工作中根据实验结果来确定显色剂的用量。 Mo(SCN)32+ 浅红 Mo(SCN)5 橙红 Mo(SCN)6- 浅红 Fe(SCN)n3-n 2）显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定） 9-3 显色反应及显色条件的选择 * 影响显色剂的平衡浓度和颜色 * 影响被测金属离子的存在状态 * 影响络合物的组成 * pH与吸光度关系曲线确定pH范围。 M + HR = MR + H+ 大多数有机显色剂是有机弱酸，且具有酸碱指示剂的性质。 9-3 显色反应及显色条件的选择 3）显色时间 有些显色反应瞬间完成，溶液颜色很快达到稳定状态，并在较长时间内保持不变;有些显色反应虽能迅速完成，但有色络合物的颜色很快开始褪色;有些显色反应进行缓慢，溶液颜色需经一段时间后才稳定。制作吸光度-时间曲线确定适宜时间。 t （ min） A T1(℃) T2(℃) t(min) A 4）显色温度 9-3 显色反应及显色条件的选择 显色反应大多在室温下进行。但是，有些显色反应必需加热至一定温度完成。 另外，还有介质条件、有机溶剂、表面活性剂等因素。 5）干扰及其消除方法 9-3 显色反应及显色条件的选择 干扰物质本身有颜色或与显色剂反应，在测量条件下也有吸收，造成正干扰； 干扰物质与被测组分反应或与显色剂反应，使显色反应不完全，也会造成干扰； 干扰物质在测量条件下从溶液中析出，使溶液变混浊，无法准确测定溶液的吸光度。 试样中存在干扰物质会影响被测组分的测定。 例如: a. 控制溶液酸度 b.加入掩蔽剂 选取的条件是掩蔽剂不与待测离子作用，掩蔽剂以及它与干扰物质形成的络合物的颜色应不干扰待测离子的测定。 c.利用氧化还原反应，改变干扰离子的价态 d