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南方新课堂2017春人教版高中生物选修一课件-专题222土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 二、“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验过程 土壤取样:从肥沃、湿润的土壤中,用无菌小铁铲铲去表层土,迅速取土壤并装入无菌信封密封 制备培养基:准备选择培养基,以尿素为唯一氮源制备9个平板培养基 样品的稀释:在火焰旁称取土壤10 g,放入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,振荡使土样与水充分混合,将菌分散。制成101倍土壤稀释液,用一支1 mL无菌吸管从中吸取1 mL土壤悬液注入盛有9 mL无菌水试管中,吹吸三次,使充分混匀,制成102倍土壤稀释液,以此类推制成103、104、105、106倍土壤稀释液 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 取样涂布:在上述培养基的9个平板底面,每三个一组分别用记号笔写上104、105、106倍的三种稀释度,然后用三支1 mL无菌吸管分别从104、105、106倍的三管土壤稀释液中吸取0.1 mL对号放入已写好稀释度的平板中,用无菌涂布器在培养基表面轻轻地涂布均匀(如图) 样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 培养观察:将培养基平板倒置于30~37 ℃温室中培养1~2 d,每隔24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果 菌落计数:常用稀释涂布平板法,设计如下表格记录并计数 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 【例2】 测定土壤中细菌的数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释。其原因是( ) A.细菌个体小,真菌个体大 B.细菌易稀释,真菌不易稀释 C.细菌在土壤中的数量比真菌多 D.随机的,没有原因 解析:在实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得的菌落数在30~300之间,适于平板计数。土壤中的微生物大约70%~90%是细菌,真菌的数量要比细菌少,所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。 答案:C 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 甲、乙、丙是三种微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是( ) A.甲、乙、丙都是异养微生物 B.甲、乙都是自养微生物,丙是异养微生物 C.甲是固氮微生物,乙是异养微生物,丙是自养微生物 D.甲是异养微生物,乙是自养微生物,丙是异养微生物 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 解析:Ⅰ培养基中没有氮源而有碳源,能在Ⅰ培养基上生长的微生物是异养型的固氮微生物,故甲为异养型的固氮微生物;Ⅱ培养基中没有碳源,能在Ⅱ培养基上生长的是自养型微生物,故乙是自养型微生物;Ⅲ培养基中有碳源和氮源,大部分的微生物都能够生长,结合丙不能在Ⅰ、Ⅱ培养基上生长,可知丙为异养型微生物。 答案:D 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 1.实验注意事项 (1)建立“无菌观念”,整个实验操作过程要严格无菌操作:实验器材、工作台、实验者、空气都要严格消毒、灭菌,包括取土样的小铁铲和盛土样的信封使用前也要灭菌。 (2)称取、稀释都要在酒精灯火焰附近的无菌环境中进行。 (3)规范操作,实验结束后一定要洗手、消毒,以防被致病微生物感染。 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 2.结果分析与评价 知识架构 一 二 误以为在以尿素为唯一氮源的培养基上只有能分解尿素的细菌才能生存。实际上微生物培养是一个非常复杂的问题,一些固氮菌能够固定大气中的氮,也可以在该培养基上生存;另外一些微生物虽然不能分解尿素,但可以利用尿素分解后的产物作为氮源,这样的微生物也能在该培养基上生存。因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需的微生物,还需进一步的验证。 【例题】 微生物需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖,下列与此有关的说法,正确的是( ) A.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的一定是能分解尿素的细菌 B.有的氮源可以作为细菌的能源物质 C.加入酚红试剂的选择培养基,可以筛选能分解尿素的细菌 D.大肠杆菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的 解析:以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌,还有可能是自生固氮菌,A项错误;硝化细菌是以NH3作为氮源和能源物质的细菌,B项正确;加入以尿素为唯一氮源的选择培养基,可以筛选能分解尿素的细菌,C项错误;大肠杆菌利用有机碳源,而硝化细菌可以利用无机碳源
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