试验例集-东洋纺.PDFVIP

高成功率高成功率PCR酶酶 PCR 实实实验验验例集例集例集 给正为验 实验例集 实 R C P 恼的您 难配对目的片段的扩增 烦 粗样品扩增(DNA未纯化) ContentsContents I KOD FX的特性 IIPCR的诸多相关条件 III实验例 基本篇 GC 3 高 含量目的片段扩增例 扩增效率的比较 3 可能的扩增片段长度 4 保真性 5 应用篇 粗样品的PCR 全血样品的扩增例(血液直接作为样品使用) 5 转基因大鼠血液(滤纸血)的GFP基因检测 6 培养细胞扩增例(细胞悬浊液直接作为样品使用) 7 通过菌落直接PCR法对酵母转化的确认 8 粗裂解液的PCR 用碱裂解法配制的Mouse tail lysate的扩增例 9 直接用Mouse tail lysate的转基因小鼠的基因分型 10 一步法配制的植物裂解液的扩增例 11 难扩增目的片段的扩增 经纯化的人类粪便DNA的Helicobactor pylori cagA基因的扩增 12 人类dystrophin基因的扩增与克隆 13 I V FAQ V KOD FX及相关产品 KOD FX的特性 『KOD FX』是以具有各种优良特性的PCR酶『KOD DNA Polymerase』 为基础开发的高性能PCR试剂。本酶显示了出色的「扩增成功率」、 「扩增效率」和「延伸性」，对各种长度的目的片段都能进行确实有效 的扩增。KOD -Plus-和KOD -Plus- Ver.2是着眼于KOD DNA Polymerase 的高保真性而开发的，而本酶则是在更注重于「扩增成功率」、「扩增效率」 1 和「延伸性」的基础上开发的（图 ）。 尤其是KOD FX出色的「扩增成功率」，可在以粗样品为模板的实验中得到淋漓尽致的发挥，即便将全血、 培养细胞等直接添加到PCR反应液中，也能得到充分的扩增。也就是说，对于原来先将样品中的DNA纯化再进 行PCR的实验，如果改用「KOD FX」，就无需烦杂的DNA纯化步骤，只需简单的样品前处理即可进行PCR实 验。 粗样品的PCR扩增!! 难配对的目的片段的扩增!! 重视扩增成功率、扩增效率、延伸性 重视保真性(约为Taq的80倍) 高保真性PCR (克隆用) ※KOD FX和KOD -Plus-系列都采用了使用抗体的热启动法。 图1. 用KOD DNA polymerase的试剂 和高保真性PCR酶KOD -Plus-、KOD -Plus- Ver.2等一样，KOD FX的PCR产物由于KOD DNA Polymerase3’→5’核酸 外切酶活性的作用，末端已被平滑化，需要针对平滑末端克隆的方法进行克隆，无法用通常的方法进行TA克隆。因此，和 KOD -Plus-、KOD -Plus- Ver.2等一样，需对KOD FX的PCR产物进行TA克隆时，请使用专用的TA克隆试剂盒『TArget Clone -Plus- Code No.TAK-201 （ ）』。 T DNA ligase TArget Clone -Plus- 10×A-attachment mix 10×A-attachment mix 与 载体和 不一样的是，