细胞的全能性与器官发生.pptVIP

3 茎尖分生组织培养 概念: 茎尖分生组织培养是指切取茎的先端部分, 进行无菌培养,使其发育成完整植株的过程。 3.1 茎尖分生组织培养的应用 3.1.1 形态建成研究 茎尖分生组织培养取材便利,培养条件能严格控制, 十分有利于形态建成的研究. 3.1.2 无病株的生产 迄今为止, 人们发现的植物病毒已超过500种, 无病毒苗的培养在农业生产中作用越来越大, 取得了良好的经济效益和社会效益. 3.1.3 营养繁殖 茎尖组织培养可以严格控制和调节适宜的营养、激素浓度、温度、光照等外部条件，使许多在常规条件下无法生长和繁殖的植物材料成功快速繁殖。 3.1.4 应用于育种 因茎尖遗传性稳定, 茎尖组织培养技术已经成熟, 因此该技术多用于常规方法繁殖困难的物种, 有性不亲和基因与不育基因型的繁殖, 新杂交种的快速繁殖, 繁殖大批遗传形状一致的亲本供大规模杂交制种。 3.2 茎尖分生组织培养的方法 3.2.1 材料的准备 3.2.2 材料的消毒 3.2.3 组织片的分离 3.2.4 培养基 3.2.5 培养条件 3.3 脱毒苗培养和病毒检测 3.3.1 脱毒苗培养的意义 可以脱除严重患病毒病植物的病毒，恢复种性，提高产量和品质。 3.3.2 热处理脱毒方法 （1）脱毒原理：因为病毒和植物细胞对高温的耐受性不同，高温可阻止病毒扩散并抑制其增殖，使病毒浓度不断降低，持续一段时间后，病毒将自行消失。 （2）热处理脱毒方法有二种：一中是温汤浸渍处理；另一种是高温空气处理。 3.3.3 茎尖培养脱毒 (1)茎尖培养脱毒理论依据： ①植物细胞的全能性学说，任何细胞都含有全套的遗传信息，具有形成完整植株的能力； ②植物病毒在寄主体内分布不均匀，茎尖部位病毒含量极低或不含病毒。 茎尖培养脱毒效果的好坏与茎尖大小呈负相关，切取的茎尖越小，脱毒效果越好；而培养茎尖成活率的高低则与茎尖大小呈正相关，切取茎尖越小，成活率越低。 (2) 茎尖培养脱毒方法 1)培养脱毒母株,获得外植体 2)选择培养基 MS适合大多数双子叶植物培养；B5和N6培养基适合于大多数单子叶植物；White培养基适合于根的培养。 3) 剥离和接种 将消毒好的茎段或芽置超净工作台的双目解剖镜下，用解剖针剥离幼叶和叶原基，切取适当大小，接种到芽分化培养基上。 4) 继代培养生根和快速繁殖 将接种外植体置于25度左右、光照度3000lx的实验室中，光周期13-16h/d，培养2-3周成苗。苗高1-2cm高时，转入生根培养基，7-10天后生根，再继代成壮苗后移栽。 (3)茎尖培养的关键技术环节 1）剥离适当大小的茎尖 一般剥离带1-2个叶原基的茎尖即可获得较好的脱毒效果。 2）选择合适培养基 生长素/细胞分裂素的比值大于1时有利于根的形成，否则有利于芽的分化。 3）给予适宜的环境条件 茎尖培养脱毒的其他几种方法： 1）热处理结合茎尖培养脱毒 2）微体嫁接脱毒 3）抗病毒药剂脱毒 4）脱毒苗保存 3.3.4 病毒的概念与形态 (1) 概念 病毒是一种非细胞形态的必须在活细胞中才能增殖的专性寄生物, 是最小的生命实体, 是由一种核酸和蛋白质衣壳组成的非细胞形态的分子生物。 （2） 病毒的形态 植物病毒的基本形态为粒体(virion, virus particle)。 大部分病毒的粒体为球状（等轴粒体）、杆状和线状，少数为弹状、杆菌状和双联体状等。 线状病毒一般长480—1250nm，宽10—13nm；杆状病毒一般长130—300nm，宽15—20nm；杆菌状病毒一般长58—240nm，宽18—19nm。球状病毒为多面体，直径16—80nm。 球形病毒的结构 (3) 植物病毒对生产的影响 引起多种植物病害，大多数植物都不同程度地 受到病毒的危害: 茄科和十字花科植物上，有50%的病害为病毒病； 在烟草,马铃薯上病毒危害重要； 在花卉上，病毒病使品质和产量降低，甚至影响进出口； 大麦黄矮病毒，曾使美国小麦损失6000万美元，加拿大损失1700万美元。 (4) 植物病毒的组成成分 植物病毒主要成分是核酸和蛋白质，核酸在内部，外部由蛋白质包被，称为外壳。合称为核蛋白或核衣壳。有的病毒粒体中还含有少量的糖蛋白或脂类、水分等。 类病毒则没有蛋白质外壳，仅为RNA的分子。 核酸是病毒的核心，组成了病毒的遗传信息组——基因组(genome)，决定病毒的增殖、遗传、变异和致病性。 (5) 病毒核酸的比例 不同形态粒体的病毒中核酸的比例不同，一般说，球形粒体病毒的核酸含量高，占粒体重量的15％— 45％，长条形粒体病毒中核酸含量占5% — 6％；而在弹状病毒中只占1％左右。 卫星RNA