第七章 食品毒理学实验基础.pptVIP

食品毒理学评价的基本目的 受试物毒作用的表现和性质 剂量－反应（效应）研究 急性(致死性)毒性试验：LD50，LD01和MTD 急性非致死性毒性试验：急性可观察到有害作用的最低剂量(LOAEL)和未观察到有害作用的剂量(NOAEL)。 亚急性、亚慢性及慢性毒性试验：LOAEL和NOAEL。 致突变、致癌和致畸等特殊毒性试验：是否具有这些特殊毒性。致畸试验，LOAEL和NOAEL；致突变、致癌试验，表观LOAEL和NOAEL 食品毒理学评价的基本目的 确定毒作用的靶器官 确定损伤的可逆性 其它：敏感检测指标和生物学标志、毒作用机制、毒物动力学、中毒的解救措施… 毒理学研究方法 体内试验 体外试验 体内实验：以实验动物为模型，最终目的是通过外源化学物对实验动物的毒性反应，向人(原型)外推，以期评估外源化学物对人的危害及危险性。 体外实验：筛选和预测急性毒性和机制研究； 人体实验和流行病学调查：进一步深化和证实在动物实验中所得到的资料。 食品毒理学动物实验的原则 化学物在实验动物产生的作用，可以外推于人 基本假设： 人是最敏感的动物物种； 人和实验动物的生物学过程包括化学物的代谢，与体重(或体表面积)相关 食品毒理学动物实验的原则 实验动物必须暴露于高剂量 “毒性试验的设计并不是为了证明化学品的安全性，而是为了表征化学品可能产生的毒作用” 成年的健康(雄性和雌性未孕)实验动物和人可能的暴露途径是基本的选择 食品毒理学研究方法的优缺点 第一节 常用实验动物选择和处理 第二节 食品毒理学试验的设计原则 第三节 毒理学试验结果处理和分析 一、常用实验动物特征 二、实验动物的选择和处理 三、实验动物的染毒和处置 实验动物(laboratory animals) 以科学研究为目的而进行科学饲养繁殖的动物。 实验动物特点 具有较小的个体差异，较强敏感性，较好的重复性与较一致的反应性。 一些遗传背景不清楚，携带病原微生物不明确，健康状况及个体差异较大，反应性不一致，一般不作为实验动物，其所取得的数据不被科学界所公认。 实验动物特点 常用实验动物生物学和生理学参数表 常用实验动物生物学和生理学参数表 实验动物的选择 选择原则 选择原则 选择方法 选择方法 品系选择 实验动物微生物控制的选择 实验动物的处理 实验动物的抓取和固定方法 实验动物的抓取和固定方法 实验动物的染毒 经口(胃肠道)染毒 经呼吸道染毒 经呼吸道染毒 经皮肤染毒 注射染毒 实验动物处置 实验动物处置 安死术及其操作方法 病理解剖和标本留取 体外试验设计 体内试验设计 体内试验设计 体内试验设计 体内试验设计 体内试验设计 体内试验设计 体内试验设计 体内试验设计 毒理学研究的数据类型 毒理学研究的数据类型 假设检验的一般考虑 生物学意义（即生物学重要性）的判断 生物学意义（即生物学重要性）的判断 生物学意义（即生物学重要性）的判断 生物学意义（即生物学重要性）的判断 思考题 二、实验动物的选择和处理 灌胃：将受试物配制成溶液或混悬液，以注射器经导管注入胃内。 大鼠隔夜禁食，小鼠可禁食4小时(因小鼠消化吸收和代谢速度较快)，均不停饮水。灌胃后2～4小时提供饲料。 经口多次染毒，一般不禁食，但应每日定时染毒。 灌胃法优点是剂量准确，缺点是工作量大，并有伤及食道或误入气管的可能。 吞咽胶囊：将一定剂量的受试物装入胶囊中，放至动物的舌后部，迫使动物咽下，此法剂量准确，适用于易挥发、易水解和有异味的受试物。缺点是动物有咬伤人的危险。 二、实验动物的选择和处理 吸入染毒和气管内注入。 静式吸入染毒：将一定数量的啮齿类动物放在密闭的染毒柜中，加入易挥发的液态受试物或气态受试物使成一定浓度。 染毒简易； 但缺点较多，主要是随试验进行氧分压降低(因此，实验动物数量有限制)，柜内受试物浓度也逐渐下降(由于动物吸入消耗、为被毛及染毒柜壁吸附所致)，而且实验动物有经皮吸收的可能。 二、实验动物的选择和处理 动式吸入染毒：由染毒柜、机械通风系统和配气系统三部分构成。 优点是在染毒过程中染毒柜内氧分压及受试物浓度较稳定； 缺点是消耗受试物的量大，并易于污染环境。 动式吸入染毒又分为整体接触和口鼻接触两种。 动式吸入染毒柜中受试物的浓度应实际监测。 气管内注入：实验动物在麻醉后，将受试物注入气管，使之分布至两肺。此法用于建立急性中毒模型及尘肺研究。 二、实验动物的选择和处理 将受试动物皮肤表面涂抹一定量的受试物，再用纱布和塑料薄膜盖上，用胶布固定，接触规定的时间。 经皮肤染毒的目的有两种： 经皮染毒毒性试验，如经皮LD50测定常用大鼠，皮肤致癌试验常用小鼠。 皮肤刺激和致敏试验，皮肤刺激试验常用兔和豚鼠，皮肤致敏试验用豚鼠。 二、实验动物的选择和处理 分为皮内注射、皮下