分子细胞生物学——物质运输1.ppt

胞质溶胶中合成的蛋白质穿过细胞核内外膜形成的核孔进入细胞核，被运输的蛋白质需要有核定位信号。 蛋白质在细胞质基质与细胞核之间的运输通过核孔复合体进行，也称为核孔运输(transport through nuclear pore)。 因核孔复合体象一扇能选择性开放的门，对核质之间的物质交换进行调控，因此把这种蛋白质运输方式又称为门控运输。 1. 门控运输 门控运输既具有选择性，又具有双向性。小分子物质可以自由地通过核孔复合体，在核质之间是一种被动运输；而大分子物质通过核孔复合体则是一种耗能的主动运输过程。 门控运输一方面介导细胞质基质的蛋白质向细胞核内运输，另一方面又可介导细胞核内的大分子向细胞质运输。 跨膜运输主要发生在细胞质基质与细胞器之间，蛋白质穿过细胞器的膜从细胞质基质进入细胞器内。 蛋白质跨膜运输需要细胞器膜上转运器的帮助，由转运器识别蛋白质的分选信号并邦助其跨膜；被运输的蛋白要有信号肽或引导肽。 一般情况下，要跨膜的蛋白质必须呈非折叠状态才能完成跨膜运输，但也有一些蛋白质可以在折叠状态下跨膜。 蛋白质从细胞质基质进入内质网、线粒体和过氧化物酶体都采用跨膜运输方式。 2. 跨(穿)膜运输 3. 膜(小)泡运输 细胞器之间通过运输小泡(transport vesicle)进行的蛋白质运输称为膜(小)泡运输。 从内质网到高尔基体、从高尔基体一个膜囊到另一个膜囊、从高尔基体到晚期内体和细胞表面以及从细胞表面到溶酶体的蛋白质运输都是通过小泡运输方式来实现的。 运输小泡直径为50-100nm，它从一个细胞器以芽生方式形成，小泡内装着运输的蛋白质，小泡膜内装着膜蛋白，当它到达靶细胞器时即与其融合，将蛋白质从一个细胞器运送到另一个细胞器。 蛋白质在细胞内的运输方式是由蛋白质分子上的分选信号决定的。 在门控运输时，蛋白质分子上的分选信号与位于核孔复合体部位的相应受体特异结合才能介导主动运输。在穿膜运输时，蛋白质分子上的分选信号必须被靶膜中相应的蛋白质转运子所识别，否则不能穿膜。在小泡运输中，蛋白质分子上的分选信号与运输小泡膜上特殊受体相结合，然后作定向运输，每种新形成的运输小泡只运送一种蛋白质，并与特定的靶细胞器融合。 三、分选信号指导蛋白质正确运输 细胞内合成的蛋白质、脂类等物质之所以能够定向地转运到特定的细胞器取决于两个方面： 一是蛋白质中包含有特殊的信号序列(导向序列，targeting sequence)； 二是细胞器上具特定的信号识别装置(分选受体，sorting receptor)。 因此内膜系统的发生具有核外遗传的特性。 基于这一实验，1975年Blobel等人提出了信号假说(signal hypothesis)，即在新合成蛋白质的N-末端有一段信号序列，称为信号肽(signal peptide)，其作用是引导多肽链在合成过程中到内质网膜上，并在内质网中完成蛋白质的合成，而信号肽本身则在蛋白质合成完成前被内质网内的信号肽酶切除。 在20世纪70年代初有一个著名的实验：在体外非细胞体系中进行由mRNA编码的分泌蛋白在核糖体上合成，当合成体系中有微粒体存在时，所合成的蛋白质与体内合成的相同； 如果在合成系统中去除微粒体，合成蛋白质的N-末端会多出一段短肽。 　　通常为15-60个氨基酸长度，位于新生肽的N端。 通过基因工程的方法证明信号序列指导的蛋白质运输和定位对蛋白质没有特异性，但不同的膜界细胞器具有不同的蛋白质定位的信号序列。 1、信号序列特性 信号序列(signal sequence)按构型可分为两种类型：信号肽(signal peptide)，信号斑( signal patch )。 信号肽是位于蛋白质上的一段连续的氨基酸序列，一般有15-60个氨基酸残基，具有分选信号的功能。在引导蛋白质到达目的地，即完成其分选信号任务后，信号肽常常从蛋白质上被切除。 2、信号序列的类型 信号斑是位于蛋白质不同部位的几段氨基酸序列在多肽链折叠后形成的一个斑块区，具有分选信号的功能。 信号斑是一种三维结构，当多肽链伸展时，组成信号斑的不同氨基酸序列可在多肽链上相距很远，在完成分选任务后，这些氨基酸序列继续存在。 信号斑引导一些其他分选过程，如在内质网合成的溶酶体酶蛋白上存在一种信号斑，在高尔基体的CGN中可被N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶