【金版学案】人教版高中生物选修1习题 专题5 DNA和蛋白质技术 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段 Word版含答案[ 高考].docVIP

课题2　多聚酶链式反应扩增DNA片段 一、PCR的原理及反应过程 1．生物体内DNA复制的条件 (1)原料：4种脱氧核苷酸。 (2)模板：解旋后的每一条DNA母链。 (3)酶：打开DNA双链的解旋酶和合成DNA单链的DNA聚合酶。 (4)引物：为DNA聚合酶的起始提供3′末端。 2．PCR扩增的原理 (1)概念：PCR即多聚酶链式反应，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。 (2)原理： ①DNA变性：在80_～100_℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。 ②DNA复性：当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链，这个过程称为复性。 ③DNA合成：DNA聚合酶从引物3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 (3)条件： ①模板：解旋后的每一条DNA母链。 ②引物：能分别与两条模板链结合的两种引物。 ③原料：4种脱氧核苷酸。 ④酶：耐热的DNA聚合酶。 ⑤其他条件：需要稳定的缓冲溶液和能自动调节温度的温控设备。 3．PCR的反应过程 二、PCR的实验操作 1．实验用具 (1)PCR仪：该仪器能自动调控温度，实现DNA的扩增。如果没有PCR仪，可用3个恒温水浴锅代替，操作时按程序在3个水浴锅中来回转移PCR反应的微量离心管。 (2)微量