蛋白样品制备全攻略双向电泳可不.pdfVIP

蛋白样品制备全攻略 双向电泳可不是一件容易的差事，花银子花时间不说，结果还很难重复。想要搞定双向电泳，关 键在于建立一套有效、可重复的样品制备方法。方法是多种多样的，不过都基本遵循以下的原则： 1. 样品缓冲液中离子浓度的控制 视，占了总蛋白的约 10-20%。这两种蛋白异 军突起，常常掩盖了其它类似大小的蛋白，使 2. 溶解包括疏水蛋白在内的所有蛋白质 我们无视低丰度蛋白的存在，也降低了双向电 3. 防止聚焦过程中已溶解蛋白质的聚焦和 泳的分辨率。因此，在分析目的蛋白之前，我 析出 们一定要先干掉白蛋白和 IgG 这两个家伙。 4. 防止样品制备过程中及其后蛋白样品的 样品中的核酸会对等电聚焦的结果产生干 酶或化学降解等的修饰反应 扰：DNA 复合物在变性条件下发