[高三理化生]PCR技术 2.pptVIP

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  • 2018-03-04 发布于浙江
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[高三理化生]PCR技术 2

* * 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, 简称PCR)是在体外模拟细胞内DNA复制过程, 形成大量特异性的DNA片段,又称DNA体外扩 增技术。(P74) 美国著名化学家,因发明PCR技术获1993年诺贝尔化学奖。本技术一 经面世,就因其快速、简单、经济的优点,风靡全球,每年创造出几十亿美元的效益。 凯利·穆里斯(Kary Mullis) 细胞内DNA复制(细胞核) DNA双链 DNA单链 RNA引物 DNA子链 ③ ① ② ①解旋酶 ②RNA聚合酶 ③DNA聚合酶 碱基互补配对原则 1、过程 2.条件 模板 原料 能量 酶 DNA双链 A、T、G、C、U ATP 解旋酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 PCR技术 成分:PCR缓冲液、DNA模版、引物(人工合成DNA单链)、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、Mg离子。(6种) 95℃高温变性:DNA碱基对间氢键断裂,DNA双链拆成单链。(代替解旋酶) 55℃低温复性:引物结合到两条分开的模板链上。 72℃中温延伸:DNA聚合酶催化,游离脱氧核苷酸从引物一端延伸。(热稳定) 温度控制:PCR仪 PCR仪 自动调节温度的仪器 循环次数 DNA数量 1 2 2 4 3 8 4 16 …

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