人Leptin的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达-中国生物化学与分子.PDFVIP

ISSN 中国生物化学与分子生物学报 第 16 卷第 6 期 CN 　113870Q Ch in. J. B iochem. M o l. B io l. 2000, V o l. 16, N o. 6, 742～ 745 2000 年　12 月 人L eptin 的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 1) 1) 2) 1) 1) 赵跃然 　游　力 　贾玉华 　高春义 　田志刚 ( 1) 山东省肿瘤生物治疗研究中心, 山东省医学科学院基础医学研究所, 济南　250062; 2) 山东医科大学附属医院外科, 济南　250012) ( ) ( ) 摘要　用 自脂肪细胞 扩增人瘦素 基因的 片段 约 500 并克隆至 R T PCR RNA lep tin cDNA bp 克隆载体 (+ ) , 获得重组质粒 , 序列分析显示获得的 基因和文献报道一 pSK pSK OB DNA L ep tin 致 用限制酶 和 从 切下并插入原核表达载体 220 的相应限制酶位 E coR B am H pSK OB pBV 点, 转化大肠杆菌 5 转化菌株经 42 ℃诱导, 检测和 印迹鉴定, 获得高水 DH SD S PA GE W estern 平重组人瘦素的表达菌株, 其表达量达菌体总蛋白的 30% 以上 关键词　 , 克隆和序列分析, 表达, 大肠杆菌 L ep tin 中图分类号　 78, 318 Q R Clon ing of Human L eptin Gene and Its Expression in E. coli 1) 1) 2) 1) 1) , , , , ZHAO Yue ran YOU L i J IA Yu hua GAO Chun yi T IAN Zh i gang ( 1) Center f or T um or B iotherapy of S hand ong , Institu te of B asic M ed icine, S hand ong A cad emy of M