生物工艺学下游技术第四章沉淀法.ppt

第四章 沉淀法 概述 沉淀法是最古老的分离和纯化生物物质的方法，目前仍广泛应用在工业上和实验室中。 由于其浓缩作用常大于纯化作用，因而沉淀法通常作为初步分离的一种方法，用于从去除了菌体或细胞碎片的发酵液中沉淀出生物物质，然后再利用色层分离等方法进一步提高其纯度。 沉淀法由于成本低、收率高(不会使蛋白质等大分子失活)、浓缩倍数高、可达l0-50倍和操作简单等优点， 定义 沉淀是物理环境的变化引起溶质的溶解度降低、生成固体凝聚物的现象。 沉淀的种类 盐析 等电点沉淀 有机溶剂沉淀 非离子型聚合物沉淀法 聚电解质沉淀法 高价金属离子沉淀法 热沉淀法 蛋白质的溶解特性 亲水性氨基酸残基基本分布在蛋白质立体结构的外表面,形成亲水区。 在水溶液中，多肽链中的疏水性氨基酸残基具有向内部折叠的趋势，即便如此，一般仍有部分疏水性氨基酸残基暴露在外表面，形成疏水区。 蛋白质表面由不均匀分布的荷电基团形成荷电区、亲水区和疏水区构成。 蛋白质分子表面的憎水区域和荷电区域 蛋白质的溶解特性 蛋白质和酶均易溶于水，因为该分子的－COOH、－NH2和－OH都是亲水基团，这些基团与极性水分子相互作用形成水化层，包围于蛋白质分子周围形成1nm～100nm颗粒的亲水胶体，削弱了蛋白质分子之间的作用力，蛋白质分子表面极性基团越多，水化层越厚，蛋白质分子与溶剂