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银屑病论文：不同条件下银屑病患者表皮干细胞分离、培养、鉴定及生物学特性的初步研究 【中文摘要】不同条件下，对银屑病患者表皮干细胞（Epidermal Stem Cells，ESCs）体外进行分离、纯化、培养及鉴定，探索找出最佳培养体系，并对银屑病患者表皮干细胞生物学特性进行初步研究，为银屑病皮损形成的深入研究提供依据。方法：银屑病皮损标本37例、正常人皮肤标本15例。ESCs分离、筛选、培养：①Dispase酶、胰酶分别4℃过夜或37℃3小时四种消化条件随机选择，进行真表皮分离效率比较；②制备单细胞悬液，比较单位面积银屑病皮损与正常皮肤表皮细胞总数、活细胞数；③IV型胶原不同浓度、不同黏附时间黏附法分选表皮干细胞，计算表皮细胞黏附率；④倒置显微镜下观察细胞生长情况。⑤ESCs表面标志物检测：a.免疫荧光细胞化学法检测原代12h、6d、12d的ESCs角蛋白19（K19）、角蛋白10（K10）的表达；b.流式细胞仪检测初黏附细胞、原代12天、P1代7天ESCs CD29（整合素β1）、CD71、P63的表达。细胞计数法绘制ESCs细胞生长曲线。结果：ESCs分离、筛选、培养：①2.5g/L Dispase II酶5%CO2、4℃过夜条件下真表皮分离效率高，总高效率达100%。②单位面积的银屑病皮损表皮细胞的数量及活细胞量均大于正常皮肤标本，结果具有显著差异（P＜0.05）。③a.IV