无菌检验课件.ppt

供试品无菌检验 供试品处理 供试品进入无菌实验室前应作表面消毒，用适宜的消毒液对供试品容器表面进行彻底消毒。 供试品无菌检验 供试品处理 供试液制备 水溶液供试品，取规定量，直接过滤或接种，必要时须冲洗或加入中和剂／灭活剂 　　a) 可溶于水的固体制剂供试品，按比例溶解稀释后同水溶液项检测 　　b) β-内酰胺类抗生素供试品，按水溶液或固体制剂项检测，以β-内酰胺酶清除或中和抗生素 　　c)具有导管的医疗器具（输血、输液袋等）供试品，以一定量冲洗液冲洗内壁后，按水溶液项检测 供试品无菌检验 供试品处理 供试液制备 非水溶性制剂供试品，稀释液中加入聚山梨酯80或其他适宜乳化剂，混合后同水溶液项检测 可溶于十四烷酸异丙酯的膏剂和黏性油剂供试品，以十四烷酸异丙酯溶解过滤，仍无法过滤者用100ml稀释液萃取上述供试液，取水相作供试品检测 无菌气（喷）雾剂供试品，-20℃冷冻1h，无菌钻孔，取样，依样品性质选择处理方法检测 装有药物的注射器供试品，药液与针头均需检测，针头直接接种 敷料供试品，100mg或1cm*3cm 肠线、缝合线等供试品，直接接种 灭菌医用器具供试品 ，直接接种 放射性药品，直接接种 供试品无菌检验 培养及观察 　按规定的温度培养14天 　培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。 结果 　澄清　　无菌生长 　浑浊　　有菌生长 　　　　　　　　　　转种同种新鲜培养基：观察是否长菌 　浑浊，无法判断　　 　　　　　　　　　　或取培养液涂片，染色，镜检 　 　 供试品无菌检验 结果判断 若供试品均澄清，或虽显浑浊但经确　　　　证无菌生长，判供试品符合规定； 若供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长，判供试品不符合规定。 供试品无菌检验 结果判断 符合下列任何一个条件，可判试验结果无效： （1）无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求； （2）回顾无菌试验过程，发现有可能引起微生物污染的因素。 （3）阴性对照管有菌生长； （4）供试品管中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所使用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的。 供试品无菌检验 结果判断 试验若经确认无效，应重试。 　重试时，重新取同量供试品，依法检查，若无菌生长，判供试品符合规定；若有菌生长，判供试品不符合规定。 谢谢大家！ 医疗器械无菌检验 何燕英 heyy2006@126.com 广东省医疗器械质量监督检验所 2011年07月 概 述 直接进入人体血液循环系统、肌肉、皮下组织或接触创伤、溃疡等部位而发生作用的制品或要求无菌的材料、灭菌器具等都要进行无菌检查。 “无菌”是指微生物存活概率低于10-6； “无菌医疗器械”表示为医疗器械中，有残存微生物的医疗器械的概率小于10-6，即一百万件中小于1件。 无菌检验 用于检验一次性使用无菌医疗器械是否染有活菌的一种方法。 本实验系将医疗器械或其浸提液接种于培养基内，以检验供试品是否有细菌和真菌污染，其全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染，同时也应避免在抑菌条件下进行实验操作。 检测标准 GB/T 14233.2-2005 《医用输液、输血、注射器具检验方法 第二部分：生物试验方法》中“3.无菌实验”。 《中华人民共和国药典》 2010年版二部附录XI H“无菌检查法”。 实验条件 无菌操作技术 实验环境 实验器材 无菌操作技术 微生物学基础 微生物实践基础 无菌操作意识 实验环境 洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域或隔离系统 定期按GB/T16292-16294-2010 《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证 实验中监控：实验时将制备好的营养琼脂平板打开放于实验台上，至实验结束收起，30 ℃ ~35℃培养48h，菌落平均数应小1cfu/φ90mm 实验器具 仪器 超净工作台、光学显微镜、恒温培养箱、压力蒸汽灭菌器、集菌仪、比浊仪等。 用具 试管、注射器、三角瓶、刻度吸管、移液器、精密pH试纸、集菌培养器、剪刀、镊子、无菌服、牛皮纸等。 实验准备 实验环境保证 实验试液 培养基 灭菌方法 实验环境保证 环境清洁，表面消毒（ 75%(V/V)乙醇、新洁尔灭(1：1000)溶液或其他适宜消毒溶液） 空气过滤系统，紫外灯或臭氧空气消毒仪 实验试液 稀释剂 1.0.9%氯化钠溶液 2.0.1%蛋白胨水溶液 3. pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液：调解pH至近中性，其中蛋白胨对菌细胞有保护作用，有利于菌数及控制菌测定 表面活性剂与中和剂 培养基 硫乙醇酸盐流体培养基(用于培养好氧菌、厌氧菌)，置30℃ ~35℃培养 其装量与容器高度的比例应符合