sd大鼠骨髓间充质干细胞体外分离.ppt

SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养的实验研究 第一组： 演讲人： 实验目的： 建立一种简便有效的体外分离纯化及培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的方法，研究BMSCs的生物学特性，为后续细胞移植和基因治疗提供理想的种子细胞。 实验结果： 大鼠BMSCs体外培养生长状况良好，可见BMSCs呈均一的梭形和多角形。流式细胞仪检测显示BMSCs表达CD29、CD90，不表达CD34、CD45。经体外诱导后具有多向分化潜能。 试验方法： 全骨髓贴壁培养法分离大鼠BMSCs，体外培养和连续传代，在倒置相差显微镜下连续观察细胞的形态变化，利用MTT法测定其生长曲线，流式细胞仪鉴定其表面抗原，成骨、成脂肪诱导分化鉴定其多向分化潜能。 结论： 全骨髓贴壁培养法适合体外分离、扩增和纯化大鼠BMSCs，培养的大鼠BMSCs具有间充质干细胞的一般生物学特性，为后续基因修饰BMSCs及其体内移植实验奠定良好的基础。 实验材料： 6~8 周龄雄性SD大鼠，体质量80~100 g，清洁级，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司[许可证号为SC-XK(沪)20082-005]。胎牛血清(美国Hyclone 公司)，L-DMEM 培养基(美国Gibco公司)，胰酶( 美国Gibco 公司)，CD34-FITC 抗体、CD45-FITC 抗体、CD90-FITC 抗体(英国AbD Serotec公司)，