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[生物学]microRNA Profiling presentation for 2006 Road show
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使用MPSS技术
使用MPSS技术
进行microRNA Profiling的介绍
进行microRNA Profiling的介绍
宝生物工程(大连)有限公司
报告内容
MPSS技术简单介绍
使用MPSS进行microRNA的解析方法
miRNA研究工具的介绍
MPSS : Massively Parallel Signature Sequencing
Massively Parallel Signature Sequencing
最强有力的基因表达定量解析方法之一。
可以一次获得~ 100万个序列信息
解析的序列长度为20nt左右
通过获得的序列可以确定基因的种类
通过获得序列出现的频率可以得到该基因的表达量
MPSS实施过程
制备Micro-beads Library
cDNA Library
Micro-beads Library
读取数据
Gen III Instrument
A A
T G T C C G
读取数据 C G A T
C
G A T C
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
数据解析
17nt ~ 20nt
1M sequences
被克隆的所有DNA片段序列信
息都可用MPSS方法获知
non-coding RNA
AAAAAA AAAAAA
GATC
CAP AAAAAA
5’-prime 3’-related
使用MPSS进行microRNA的解析方法
microRNA (miRNA)
・19 - 25 nt ( 21-23 nt, 18-24 nt, 20-22 nt, 20-25 nt ) ssRNA
・基因表达的调控
参与细胞的发生、分化、增殖、凋亡、压力应答等的调节
・与Target mRNA的3’UTR结合进行表达抑制
分解target mRNA使基因转录后沉默
・有Hairpin构造的前体
lin-4 : C. elegans
let-7 : C. elegans
miRNA的
形成过程 转录产物
pri-miRNA
Drosha
pre-miRNA
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